배지 제조 및 무균조작법 Report

소개글

배지 제조 및 무균조작법 Report에 대한 보고서 자료입니다.

목차

Ⅰ. 기본정보

Ⅱ. 서론 (Introduction)
1. 배지 제조
1-1) 배지 (medium)
1-2) 배지의 종류
1-3) 배지 제조 시 주의사항
1-4) 배지의 조성
2. 무균조작법
2-1) 고체 평판 배지를 이용한 미생물의 순수 배양
2-2) 주의사항

Ⅲ. 실험재료 및 방법 (Materials & Methods)
1. 실험재료(Materials)
1-1) 배지 제조
1-2) 무균조작법
2. 실험 방법 (Methods)
2-1) 배지 제조 – 습윤멸균법
2-2) 도말 평판법 - spreading
2-3) 획선 평판법 (streaking)

Ⅳ. 실험결과 및 결론 (Data and Results)

Ⅴ. 고찰 (Discssion)
1. 순수 분리할 때 단일 콜로니를 얻어야 하는 이유?
2. 주입평판법
3. 그 외의 배지 종류
4. SS나 TCBS의 경우에는 가압멸균하면 안되는 이유

Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence)

본문내용

멸균이 끝나고 고압 증기가 배출되어 압력이 완전히 내려가면 고압 멸균기를 열어 멸균된 배지를 꺼내서 식힌다.
(LB agar의 경우, 멸균이 끝나면 배지가 식기 전에 culture dish에 하나당 25ml씩 부어준다.)
2-2) 도말 평판법 - spreading
고체 평판배지 뒷면에 날짜, 시간, 균 이름 및 정보, 실험자 이름을 쓰고, 1번으로 표시한다.
미생물이 배양된 액체 시료를 10-6배로 희석(serial dilution)하고, pipette을 이용하여 0.1 ml 취한다.
취한 액체 시료를 고체 평판배지에 균주한다.
멸균된 삼각봉으로 부드럽게 밀면서 도말한다.
도말이 끝난 배지는 incubator에 뒤집어서 보관한다.
24h 배양 후 CFU를 측정한다.
2-3) 획선 평판법 (streaking)
고체 평판배지 뒷면에 날짜, 시간, 균 이름 및 정보, 실험자 이름을 쓰고, 2번으로 표시한다.
사용할 백금이를 멸균한다.
미생물이 배양된 플라스크를 열고 입구를 멸균한다,
분리하고자 하는 미생물이 배양된 현탁액을 흔들어준다.
멸균된 백금이를 충분히 식힌 후 미생물 현탁액을 취한다.
플라스크의 입구와 마개를 멸균하여 닫는다.
고체 평판배지에 도말한다. (4분법)
사용한 백금이는 멸균 후 정리한다.
도말이 끝난 배지는 incubator에 뒤집어서 보관한다.
Ⅳ. 실험결과 및 결론 (Data and Results)
결과사진
배지 제조 획선평판법 도말평판법
1번은 차례로 그은 획선에 따라 처음에 그은 부분은 많은 군락을 이루고 있지만 그 다음, 또 그 다음 획선 부분에는 점점 더 작은 군락을 이루고 있다.
2번은 1번과 달리 부분적으로 군락을 이루는 것이 아니라 전체적으로 이루고 있다.
Ⅴ. 고찰 (Discssion)
1. 순수 분리할 때 단일 콜로니를 얻어야 하는 이유?
Colony 대장균이나 고초군과 같이 증식이 빠른 균을 적당한 배지에 배양하면 24시간 안에 육안으로 확인이 가능하다. 하지만 결핵균의 콜로니 형성은 균의 종류나 배지의 조성, 배양 시간, 온도, 습도 등 많은 인자에 영향을 받는다.
2. 주입평판법
서로를 여러 번 희석하여 각각의 희석액을 소량 취해서 용해된 각각의 고체배지와 혼합하여 페트리 접시에 붓는다. 이때 몇몇의 체트리 접시에서는 분리된 군락이 형성될 것이다.
3. 그 외의 배지 종류
3-1) Sodium Brain Heart Infusion Agar (BHIA)
이 배지는 장내 세균의 활성 또는 독성등을 유지하기 위한 용도로 사용되는 배지이다. 수산쪽에서도 많이 사용하고 다른 곳에서도 이 배지를 거의 LB배지보다 더 자주 사용합니다. 그만큼 고영양 배지이다.
3-2) Thiosulfate Citrate Bile Sucrose Agar (TCBSA)
비브리오(Vibrio) 선택배지. 가압멸균을 하면 안되는 배지로 초록색을 띈다.
3-3) Salmonella Shigella (SS)
이 배지는 멸균 금지의 배지라서 미리 병을 멸균한 다음 배지를 만들어줘야한다. 에드워드 병 또는 Salmonella shigella를 분리하기 위한 선택배지로 빨간색을 띈다.
3-4) Todd Hewith agar (THA)
Strepto 선택배지라고 한다.
3-5) Mueller Hinton Broth (MH)
MH배지는 항생제 테스트용으로 많이 사용되는 배지이다.
4. SS나 TCBS의 경우에는 가압멸균하면 안되는 이유
열에 많이 노출하게 되면, 침전물이 생기거나 안에 있는 영양성분이 파괴된다.
Ⅵ. 참고 문헌 (Reforence)
1. 미생물학실험/고영진 외 19명/월드사이언스/21p~35p
2. 미생물학실험/방병호 외 7명/진로연구사/43p~53p
3. 배지란 무엇인가?/조혜빈/한국분석시험연구원
4. 배지 [culture medium, 培地]/두산백과 두피디아, 두산백과/지식백과
5. 배양배지 [culture medium]/미생물학백과/지식백과
6. 배지의 종류 및 조제법이란? / 나주대학 호텔조리제빵학부 / slidesplayer
7. 우유 단백질인 카제인을 소화효소인 트립신으로 분해한 물질
8. 우유 단백질인 카제인을 소호효소인 펩신으로 자른 물질
9. 2주 배지의 제조/www.kdu.ac.kr/발효식품 제조 및 관리
10. 액체배지 종류, 반고체배지, 고체배지, Agar의 함량, midia의 종류/임상병리 국가고시 대비
11. [실험 정보] 배지만들기, 배지의 종류와 미생물 배양/몽이 researcher/tistory

키워드

미생물학,   미생물학및실험,   의생명공학과,   배지제조,   무균조작법