[A+] 미생물 배양 배지 제조 실험보고서

소개글

[A+] 미생물 배양 배지 제조 실험보고서에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 원리
3. 실험 준비물
4. 실험 방법
5. 실험 결과 및 고찰
6. 참고 문헌

본문내용

씌우고 윗부분에 배지의 종류와 실험자의 이름을 기재한다.
5. Autoclave에 증류수가 충분히 들어있는지 확인한 뒤, 4의 bottle을 넣어준다.
6. Autoclave를 고무 패킹이 어긋나지 않도록 잘 닫은 뒤, 121°C에 15분을 설정하여 멸균을 시작한다.
7. 멸균이 끝나면 적당히 식히고(50~60°C), 그 사이 생물안전 작업대 내부를 70% 소독용 ethanol로 닦아 준다. (소분 전에 완전히 식히면 한천에 의해 굳으므로 주의할 것)
8. UV 램프를 켜고 작업대 내부를 살균 후 램프를 끈다.
9. 작업대 내부에 들어가는 기구들에 70% 소독용 ethanol을 분사하여 소독한 후 작업대 안으로 넣어준다.
10. 라텍스 장갑을 낀 손을 70% 소독용 ethanol로 소독하여 작업대 안으로 넣어준다.
(옷이 작업대 안으로 들어가지 않도록 소매를 올려줄 것)
11. 알코올 램프에 불을 붙이고, LB Agar 배지가 든 bottle의 입구를 화염 멸균해준다.
화염 멸균 과정
화염 멸균 과정
12. Petri dish에 배지를 약 20ml씩 나누어 부어주고, 2시간 동안 굳혀준다.
Petri dish에 배지를 나눠서 넣어준다
13. 굳은 배지는 뚜껑을 덮어 sealing한 후 dish의 바닥면 상단에 제조일을 기록한다.
완성된 Petri dish
14. 균주배양에 사용하기 전까지 오염되지 않도록 4°C에서 보관한다.
5. 실험 결과 및 고찰
완성된 액체배지
완성된 고체배지
1. 제조된 배지의 사진을 붙이고 고찰을 기재하시오.
-> 20mL의 액체배지와 고체배지 200mL를 만들었다. LB powder를 정량 할 때 목표 질량을 넘기지 않도록 주의해야 한다. 따라서 조금씩 질량을 추가하면서 목표 질량에 다가가야 한다. 만약 목표 질량을 넘어버렸다면 시료를 다시 담지 말고 새로운 시약지에 다시 정량해야 한다.
2. LB 배지를 구성하는 성분들과 그 기능에 대해 기재하시오.
LB배지 구성 성분
성분의 기능
1
Yeast extra
효모에서 추출된 성분으로 미생물의 생장에 필요한 영양분을 공급한다.
2
Tryptone
단백질을 분해하여 미생물 생장에 필요한 질소를 공급한다.
3
Sodium chloride
세포의 삼투압 조절에 이용된다.
3. 고압증기멸균기(Autoclave) 사용 시 주의사항을 기재하시오.
-> 고압증기멸균기(Autoclave)는 수증기와 압력을 이용하여 작동하는 멸균 장치이다. 기준선까지 물을 채우는 것이 중요하다. 높은 압력을 유지시키는 장치로는 고무패킹이 사용된다. 따라서 뚜껑을 닫는 과정에서 고무 패킹이 잘 맞는지, 찢어지지 않았는지 면밀히 확인해야 한다. 고압증기멸균기는 높은 열을 이용하기 때문에 항상 화상에 주의해야 한다. 작동 중 혹은 작동이 끝난 뒤 문을 열 때 고온에 의한 화상에 주의해야 하며 적정 온도로 냉각된 후 문을 열어야 한다.
4. 무균실험대(clean bench) 사용 시 주의사항을 기재하시오.
-> 무균실험대(clean bench)사용에 있어서 크게 위험이 될만한 요소는 존재하지 않는다. 하지만 무균실험대 내부를 살균하기 위한 UV램프를 켠 상태로 사용하게 될 경우 자칫하면 눈과 피부 등의 부위에 화상을 입을 수 있으므로 반드시 전원의 여부를 확인해야 한다. 또한 무균실험대 내부에서 가스버너와 알코올램프와 같은 불을 다루는 도구를 사용할 경우 화재 사고에 각별한 주의가 필요하다. 마지막으로 무균실험대는 실험자를 보호하는 실험장비가 아니므로 인체감염균, 바이러스, 유해 화학물질 등을 절대 사용해서는 안된다.
6. 참고 문헌
www.labs.go.kr-연구실 주요 기기, 장비 취급관리 가이드라인
네이버 지식백과

키워드

미생물 배양,   미생물,   배지,   멸균기