세균을 숙주로 하는 바이러스의 증식 및 동물병원 바이러스

소개글

세균을 숙주로 하는 바이러스의 증식 및 동물병원 바이러스에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 세균을 숙주로 하는 virus 의 증식

2. 동물병원 virus

(1) 동물세포의 특성

(2) 동물성 바이러스

(3) 세포의 형질전환 (cellular transformation)

(4) 동물 바이러스 배양을 위한 숙주 (viral host)

(5) 동물바이러스 시험법 (assay of animal viruses)

* 참고문헌

본문내용

다층의 세포 덩어리를 세어 봄으로서 형질전환을 유도하는 바이러스의 수를 셀 수 있는 것이다.
3) 물리화학적인 방법 (chemical and physical methods)
a) 전자현미경을 이용하는 방법 (electron microscopy)
전자현미경은 그 해상도가 1nm 정도이므로 일반적으로 10nm 이상인 바이러스의 입자를 볼 수 있다. 이 방법으로는 바이러스 입자의 수나 입자의 모양을 측정할 수 있다.
b) 초원심분리법 (ultracentrifugation)
밀도의 층 (density gradient)을 이용하여 매질의 밀도와 같은 밀도를 가진 바이러스 입자를 분리하는 방법이다.
c) 전기영동법 (electrophoresis)
바이러스의 단백질 (protein) 이나 핵산 (nucleic acid)을 분석할 때 이용하는 방법으로, acrylamide나 agarose와 같은 겔상태의 물질을 이용하여 단백질이나 핵산을 그 크기에 따라 구분할 수 있는 방법이다.
d) 면역학적 방법 (immunological methods)
면역학적인 방법으로 바이러스를 조사하는 방법은 항원-항체 반응을 이용하는 시험법들이며, 혈청학에서 이용하는 각종의 방법들이 이용된다.
중화항체법 (neutralization test)은 바이러스의 감염성을 항체가 없애주는 것을 이용하는 방법으로, 먼저 바이러스를 항체와 반응시킨 후, 바이러스와 반응한 항체 때문에 바이러스가 숙주세포에 감염되지 못하여 증식하지 못하는 정도를 측정한다.
혈구응집 방해법 (hemmagglutination inhibition, HI)은 혈구응집원이라는 적혈구 응집기능이 있는 단백질 (HA protein)을 생산하는 바이러스를 분석할 때 이용된다. 혈구 응집능력이 있는 바이러스는 적혈구를 서로 연결하여 커다란 적혈구 응집체를 형성한다. 이러한 성질이 있는 바이러스에 혈구응집원에 대한 항체를 반응시키면, 바이러스가 혈구응집원을 이용하여 적혈구를 응집할 수 없게 된다
보체고정법 (complement faxation, CF)은 항원과 항체가 결합된 항원-항체 복합체가 혈액에 존재하는 보체를 활성화시키는 성질을 이용한 방법이다. 즉, 바이러스를 항체와 반응시킨 후, 바이러스와 결합된 항체가 혈액의 보체를 활성화시켜 혈액의 보체가 사라지는 것을 측정한다.
면역침전법 (immuno-precipitation reaction)은 바이러스 항원과 항체를 반응시켜 생성되는 침전을 분석하는 방법으로 주로 특정한 바이러스 항원을 분리할 때 이용한다.
면역형광법 (immunofluorescence)은 항체에 형광물질을 결합시켜, 바이러스에 감염된 세포나 조직과 반응시켜 봄으로서 바이러스의 존재여부를 조사할 때 많이 이용한다.
효소면역시험법 (enzyme linked immuno-sorbent assay, ELISA)은 효소가 결합된 항체를 이용하여 이 항체와 반응하는 항원의 양을 조사할 때 이용하는 방법으로, 현재 많은 종류의 바이러스 감염증 진단에 이용되고 있다.
e) 방사능 동위 원소를 이용하는 방법 (radiochemicals)
이 방법은 방사능 동위원소 (radio-isotope)를 이용하여 바이러스의 단백질이나 핵산을 표지하고, 이들 단백질이나 핵산이 어떻게 되는 지를 조사할 때 이용한다. 32P는 핵산을 표지할 때 사용하며, 35S는 단백질을 표지할 때 이용한다.
f) 바이러스의 효소를 이용한 방법
바이러스가 가지고 있는 효소의 양을 측정함으로서 바이러스의 증식정도를 상대적으로 측정할 수 있다. 이 경우 조사대상이 되는 효소는 바이러스에만 있어야 하며 숙주세포의 효소 때문에 오 반응이 나타나서는 안된다. 이러한 방법으로 사용되는 대표적인 효소에는 레트로바이러스 증식을 조사하는 데 이용되는 역전사효소 (reverse transcriptase)의 분석법을 들 수 있다.
g) 분자생물학적 방법 (molecular biological technique)
분자생물학적인 방법은 최근에 바이러스의 분석법으로 많이 이용되고 있는 방법입니다. 특히 바이러스의 경우는 genome이 작기 때문에 특히 분자생물학적 방법이 많이 이용된다. 핵산결합법 (nucleic acid hybridization)은 세포나 조직에 특정한 바이러스의 genome이나 유전자가 존재하는 지를 조사할 때 이용된다. 이 방법은 genome과 결합할 수 있는 (hybridize) 핵산 (probe)을 합성하고, 이 핵산을 방사능 등으로 표지한 다음, 이 probe 핵산과 결합하는 바이러스 genome이나 유전자가 존재하는 지를 조사하는 것이다. 이 방법은 더 나아가 바이러스의 특정한 유전자를 분리해낼 때에도 이용된다 (viral gene cloning).
바이러스는 genome이 작기 때문에 바이러스 genome 전체를 분리해내고 그 염기배열을 밝힐 수도 있다. 더 나아가 분리된 바이러스 genome을 이용하여 시험관에서 특정한 유전자의 돌연변이를 유도 할 수도 있다 (in vitro mutagenesis).
최근에는 중합효소연쇄반응 (Polymerase Chain Reaction, PCR)을 이용하여 바이러스의 genome을 조사하는 방법이 많이 이용되고 있다. 이 방법은 특히 바이러스가 지속감염을 하면서 아주 소수의 바이러스만을 증식시킬 경우 몇 개 안 되는 바이러스 genome이나 유전자의 존재를 확인할 때 많이 이용된다. 이 방법은 적은 수 존재하는 바이러스 genome이나 유전자, 전사체 등을 증폭해 낼 수 있는 방법으로 조직 중에 비록 한 개의 genome만이 있다하더라도 곧 수만 개의 genome으로 증폭시킬 수 있는 방법이다. 이 방법은 또한 바이러스의 genome이나 유전자를 클로닝할 때에도 이용된다.
* 참고문헌
△
바이러스학
이재열 장무웅 공저 자유아카데미 2001年
△ 바이러스 DNA 복제기작과 단백질의 상호작용에 관한 연구
과학기술부 편 과학기술부 2002年
△ 식물바이러스
이기연 저 농업과학기술원 2001年
△ 식물바이러스학 개론
최창경 이상경 공저 강원대학교출판부 1993年
△ 식물바이러스학
최창경 저 향문사 1996年

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