[생화학 실험보고서] 동물세포막과 식물씨앗에서의 지질추출과 정성분석

본문내용

) chromatography의 종류?
- 크로마토그래피는 이동상의 상태에 따라 기체 크로마토그래피(Gas Chromatography: GC)와 액체 크로마토 그래피(Liquid Chromatography: LC)로 나눈다. 또 고정상의 상태와 종류에 따라 고정상을 컬럼에 넣고 용리 시키는 컬럼 법과 고정상을 얇은 판 위에 입히거나 거름종이를 사용하는 판 법으로 세분된다.
- 컬럼 크로마토그래피(Column Chromatography)는 흡착제를 채운 관 윗 부분에 시료를 흡착시켜 전개 용매 를 흘려서 분리시키는 크로마토그래피이다. 관에 알루미나(alumina), 실리카겔 혹은 용도에 따라 이온 교환 수지 및 분자의 크기에 따라 분리할 수 있는 겔 등을 채운다. ‘머무른 시간(retention time)’이나 ‘머무른 부 피(retention volume)’를 비교하여 분석한다. GC나 LC등은 컬럼 크로마토그래피를 개선한 방법이다.
- 종이 크로마토그래피(Paper Chromatography: PC)는 엄밀히 말하면 PC는 흡착과 분배 크로마토그래피가 혼 합된 것이다. PC에서 용질은 셀룰로오스의 수화된 물과 유기 상 사이에서 분배되므로 극성이 크거나 여러 작 용기를 가진 화합물을 분리할 때 이용한다. PC는 주로 Whatman No.1 여과지를 적당한 크기로 잘라서 한 끝 을 시료 액에 담가 전개시킨다. 분리된 성분의 이동 거리와 용매의 이동 거리의 비인 이동율(Rf)로 성분을 분 석한다. PC는 저렴하지만, 분리된 성분의 위치를 확인하려면 발색시켜야 하고 혼합물의 회수가 불가능하며, 분리된 성분도 회수가 불가능하다.
- 얇은 막 크로마토그래피(Thin Layer Chromatography, TLC)는 흡착제인 실리카겔 혹은 알루미나를 유리판 위에 얇게 입힌 고정상 판에 용매를 이동상으로 하여 전개할 때, 고정상과 이동상에 대한 시료 성분의 분배 정도 차이를 이용하여 분리하는 방법이다. TLC는 종이 크로마토그래피(PC)의 단점을 보완하였다. 즉, 분리된 각 성분의 회수가 비교적 용이하며, 분리된 성분의 위치도 UV lamp로 비추거나 요오드 증기를 흡착시켜 확 인할 수 있다. 또 분리할 수 있는 화합물의 종류가 PC보다 다양하다. 특히, TLC는 미량 시료의 분석이 가능 할 뿐 아니라, 전개 시간이 짧고 여러 온도에서 전개가 가능하여 광범위하게 이용된다.
3) saponication의 원리?
- 비누를 만드는 화학반응은 가수분해반응과 중화반응의 단계를 거쳐 진행되는 매우 특이적인 반응으로서 비누 화 반응(saponication)이라고 칭한다. 비누화 반응은 강알칼리가 유지(fats and oils)와 접촉할 때 유지의 주 성분인 triglyceride의 ester 결합을 가수분해하여 한 분자의 glycerol과 3분자의 fatty acid를 만들며, 이 반응과정을 가수분해 과정이라고 한다. 그리고 이렇게 생성된 지방산은 강알칼리와 반응하여 최종 생성물인 지방산염(대개 나트륨염)을 생성하고, 이 과정을 중화반응이라고 한다.

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