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DNA에 오염되었나, 즉, DNA의 순도를 확인할 수 있는데 실험 결과 A260/A280의 비는 0.957로 순수한 DNA로 여겨지는 1.8보다 훨씬 작다. 따라서 DNA에 단백질이 불순물로 많이 섞여 있다고 결론지을 수 있다.
전기영동을 이용하여 단백질과 DNA의 크기를
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전기영동 결과를 통해 알 수 있었다. 한 개의 종자(4번)만이 대립되는 두 allele을 갖지 못하여, 1개의 밴드만 나타냈기에, 따라서 자식 오염주는 4번이다.
또한 멜론 샘플들의 순도는 80%임을 알 수 있었고, 멜론 종자의 순도검정시 DNA mar
ker를 이
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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DNA의 ratio를 잘 맞추는 것이 중요하다. 무조건 1:1이 아니라 길이, molar 농도를 참고 해서 맞춰야 한다. ligation이 잘 되었는지 확인하기 위해서는 cloning 까지 마쳐야 한다. cloning이 금방 끝나는 것이 아니라 오래 걸린다. 또, 제대로 colony가 뜨지
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