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단백질을 묻혔다던가 순서를 잘못바꿔서 흡광도를 재었다고 생각할 수 도 있다. 또한 Lowry method 에서는 Folin 시약을 넣을때 30초 간격으로 넣어주고 정확히 45분뒤에 다시 30초 간격으로 순서대로 흡광도를 측정해 주어야하는데 이것을 정확하
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외 2인/ 유전공학의 이해/ 라이프 사이언스/ p. 192
- https://bio-chae.com/ripa-lysis-buffer/ 1. Title
2. Objective
3. Method
1) Cell harvest
2) Protein sampling
4. Result
5. Discussion
1) SDS(sodium dodecy sulfate)
2) lysis buffer
3) Bradford 시약
6. References
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이용하여 단백질 농도 그래프를 작성하고 오줌의 단백질 농도를 측정한다.
- Bradford법: 색소가 단백질의 염기성과 방향족 아미노산 측쇄와 결합하여 이를 흡광도 측정→단백질 정량 하는 방법
*시약 및 기재:
①Bradford 염료 시약 - Coomassie Brill
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단백질의 함량변화를 측정하는 데는 매우 유용한 방법이다.
*Lowry 실험의 장점과 단점*:Lowry 방법은 단백질의 아마이드 결합에 의한 구리이온의 환원을 토대로 측정하는 방식이다. (Cu2+ --> Cu1+) 따라서 위 Bradford방법보다는 단백질간의 차이가
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Bradford 시약을 4℃에서 보관하더라도 그 감도가 떨어져서 표준곡선을 다시 그려야한다.
- Bradford 시약은 시간이 지남에 따라 단백질에 대한 반응성이 감소하게 되는데, 따라서
실험이 1시간 이상 길어지게 되거나 시약을 보관했다가 다시 사용
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