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1. 운반체로서의 plasmid란 무엇인가?
2. 분자유전학적 관점에서의 plasmid의 용도와 그 기능을 간략히 서술하시오.
3. Plasmid 구조(형태)에 대해 서술하시오. (그림포함)
4. 자신의 DNA gel 사진을 첨부하시오.
5. Gel 사진을 보고 Uncut DNA, Vector, I
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site를 정하고 design 하시오.
7. 만약에 cloning은 정상적으로 되었는데 단백질 추출이 되지 않았을 경우, bacterial cell 내에서 무슨 일이 일어났을지 가설 설정과 원인을 밝혀낼 수 있는 방법 및 이 문제를 해결하기 위한 대안을 제시해 보시오.
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Plasmid DNA의 추출과 Restriction enzyme에 대한 결과를 동시에 확인할 수 있는 실험이었습니다. 1. 완충액(Buffer)의 조제 (0.05M 구연산 완충액)
2. BRADFORD 시약을 이용한 단백질 정량
3. Plasmid purification by spin column (Miniprep)
4. Plasmid DNA digestion by R
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공식 학술카페) - Plasmid prep
- [네이버 지식백과] 플라스미드 [Plasmid] (분자·세포생물학백과)
- 김명원 외 9명, 생명과학 개념과 현상의 이해, PEARSON, 186page, 210~212page 1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고 문헌
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DNA 정량 분석 및 정성 분석의 중요성
- 정제를 하는 이유는 잘린 것에 효소, 잘린 조각 등 불순물이 많기 때문에 필요한 DNA만 쓰고 측정하기 위해서 한다. 또한 제한효소 처리를 해서 Plasmid DNA와 Insert DNA를 자를 때 정제를 하지 않으면 잘 잘리
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전기영동 이동거리로 분석한 결과와 일치한다.
agarose gel은 polyacryamide보다 큰 통로를 가지고 있어 분자량이 큰 DNA를 분리하는데 적합하기 때문에 DNA 크기 측정에 이용된다. DNA 전기영동도 단백질의 전기영동과 마찬가지로 큰DNA가 작은 DNA보다
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DNA marker를 이용한 멜론의 일대잡종품종 순도검정. 1-5
- 김두환 DNA marker를 이용한 F₁순도 검정. 한국원예학회지 13-13
- http://joonyoungsun.tistory.com/entry
- http://100.naver.com/ 1. Abstract
2. Introduction
3. Materials and methods
4. Result and discussion
5. References
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영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
1㎕
5' primer
1㎕
3' primer
1㎕
DW
17㎕
total
20㎕
<
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기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Discussion
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