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et 용액을 1~2방울 가한뒤 3분간 방치한후 염색약을 버리고 물로 씻는다 (washing 세척)
(6) 95% ethyl alcohol로 30초 동안 탈색후 물로 씻는다. 탈색 과정이 매우 중요한 과정이므로 주의해야 한다
(8) Safranin으로 30초간 대조 염색한 후 물로 씻는다
(9)
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Gram 양성, 대비 염색한 염료의 색깔을 나타내면 Gram 음성이다.
⑨ Gram염색 방법에는 많은 변법이 개발되어 사용되고 있으므로, 평소에 즐겨 사용하는 다른 방법이 있으면 그 방법을 사용하여도 무방하다.
※ Gram 염색약
⑴ Crystal violet 용액
① C
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1. 실험 결과
가. Bacillus cereus Gram 염색 결과
보라색의 기다란 막대기 모양으로 균이 나타나는 것을 확인할 수 있다.
Crystal Violet, 아이오딘 용액, 에탄올, Safranin을 첨가하였을 때 보라색을 계속 유지하였다.
나. Escherichia coli Gram 염
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염색을 한다. 그리고 증류수로 세척하여 관찰을 하면 된다. 이 때, Gram 음성균이 붉은 염색이 되는 원리를 자세히 알아보면 Gram 염색 과정에서 두꺼운 펩티도글리칸 층에 의해 강력하게 유지되는 양성균의 Mg-RNA-CVI complex과는 달리 알코올 세척
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등이 여기에 속한다.
또, positive균은 색소나 약제를 수용하는 능력이 높다고 하는데 만약 safranin을 먼저 염색하고 crystal violet을 대조염색으로 썼다면, 반대로 까진 아니더라도 양성균도 분홍색으로 염색되어 나오지 않았을까 싶다. 없음
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염색
도말-건조-고정-crystal violet-iodine-ethanol-safranin
세포가 보라색됨
그람 양성 - 보라색
그람 음성 - 알코올에 의해 무색으로 탈색되고, 사프라닌(마지막과정)으로 붉은색 됨
그람 음성균에만 외막이 존재함, 펩티도글리칸층 바깥에 有, 크 단
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