DNA 추출 및 PCR 와 PCR 결과 확인전기영동

소개글

DNA 추출 및 PCR 와 PCR 결과 확인전기영동에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험목적
2. 배경지식
3. 가설설정
4. 실험
5. 결과
6. 고찰
7. 인용문헌

본문내용

동안 굳힌다(gel cast에 붓기 전에 삼각플라스크 안에서 굳지 않도록 주의).
2-2. 전기영동
1. 직접 만든 1.8% gel에는l micropipet을 사용해 ladder marker 3㎕를 첫 번째 well에 넣고(pipetting), PCR product 3㎕를 두 번째 well부터 순서대로 넣는다.
2. 미리 준비된 0.8% gel에는 micropipet을 사용해 HindⅢ marker 5㎕를 첫 번째 well에 넣고(pipetting), DNA 추출액 5㎕를 2㎕ loding dye tube에 넣어 혼합한 후(vortexing 후 spin down)에 두 번째 well부터 5㎕씩 micropipet을 사용해 순서대로 넣는다.
3. 전기영동장치 전원코드를 연결하고 뚜껑 홈이 금속에 잘 들어가도록 맞춰 덮은 후 100V에서 26분 동안 전기영동 한다(-극에서 +극 방향 확인).
4. 완료 후 전기영동장치의 전원을 끄고, 코드를 뺀다.
5. 일회용 비닐장갑 착용 후 gel이 gel cast에서 분리되지 않도록 주의하면서 꺼낸다.
6. Gel을 UV lamp위에 올려놓고 뚜껑을 반드시 닫고, 스위치를 켠 후 빠르게 관찰한다(강한 자외선으로 인해 시력저하, 피부암 등이 발생할 수 있으니, 관찰 시에는 반드시 뚜껑을 닫고 관찰할 것, 육안 관찰 시 UV 70%, 사진촬영 시 100%로 맞출 것).
7. 관찰이 끝나면 UV lamp의 전원을 끄고, 관찰한 gel은 바로 일회용 비닐장갑에 싸서 버린다.
5. 결과(Results)
PCR결과 확인
그림2. PCR 결과 확인
ㄴㄴㄴ
6. 고찰(disscussion)
지난번 dna 추출 및 pcr 실험에서 실험과정 중 원심분리를 하는 횟수가 많았는데 그 중간에 buffer CL, Rnase A등등 여러 시료들의 첨가하는 과정이 있었다. 그 중에서 buffer CL,buffer WA와 같은 시료들은 그 시료들의 이름이 의미하는 것처럼 완충액 역할을 하였고, Rnase A는 명칭에 나와있듯이 rna를 자르는 역할을 한다. 이와 마찬가지로 이 실험에는 사용되지 않았던 Dnase는 dna를 자르는 역할을 하는데, dna추출 실험에 Rnase를 쓴 이유는보통 DNA 를 뽑으면 RNA도 같은 원리로 뽑혀져 나오는데 우리가 필요한 것은 DNA이지 RNA가 아니기 때문에 필요없는 RNA 를 잘라서 없애기 위해서 첨가하는 것이다. proteinase도 위의 내용에서 역할을 유추해 낼 수 있는데 각종 단백질, 펩티드에 작용해서 그 분자내부의 펩티드결합을 가수분해하는 역할을 한다. absolute ethanol은 비극성 물질로 dna분리시 침전을 시켜주는 역할을 한다. 이러한 많은 시료들을 이용해 dna를 정제 할 수 있다.
이번 실험은 지난 실험 때 추출한 DNA의 PCR결과를 전기영동으로 확인하는 실험이었다.처음에 DNA의 분자량이 작을수록,DNA의 크기가 클수록 더 많은 거리를 이동 할 것이라고 예상했다. 단순하게 질량이 작을수록 많은 거리를 이동할 것이라고 생각했고 DNA의 인산기가 (-)전하를 띠기

키워드

DNA 추출 및 PCR 와 PCR 결과 확인전기영동,   생물,   생명,   전기영동,   대학교