기기분석 액체크로마토그래피에 의한 정성 분석

목차

-예비보고서-
1. 제목
2. 실험 목표
3. 실험 원리
4. 시약 및 기구
5. 실험 방법
-결과보고서-
6. 결과 및 토의

본문내용

lter : 5초당 0.1로 처리
Auto Zero : 기기의 영점을 새로 잡아준다.
3. Pump 조건 맞추기
-Waters 600E Multisolvent Delivery System
-용매지정(A part, MeOH: H2O=80:20)
-Home Key와 방향키를 이용하여 Flow rate 를 0.2 ml/min씩 30초 간격으로 천천히 1.2 ml/min까지 올린다.(0.2→0.4→0.6→0.8→1.0→1.2)
-한시간 정도 이동상을 흘려주어 기기를 안정화시킨다.
4. 컴퓨터 on, Autochro icon을 실행
5. Directory를 만들어 주고 실험할 시료 갯수를 정해준다.(새파일)
6. data수집 채널을 선택한다.(채널 선택)
7. 채널을 선택한다.(채널 1)
8. 실험조건을 잡아준다
9. 수집설정화면 및 메뉴의 아래화면
10. 수집설정의 오른쪽 화면 : 수집비(10)와 수집시간(12분), 외부트리거 선택 → 확인
11. 준비상태가 되면(Base line이 안정화) syringe를 이동상으로 5회 이상 washing해주고 sample로도 5회 이상 washing 한다.
12. 시료를 20㎕이상 취한다. ( bubble이 생기면 절대 안됨) - Injection port에 찌르고 트리거를 밑으로 (inject) 내린다. (syringe를 고무에 밀어 넣는다는 느낌이 끝날 때까지 완전히 밀어준다.)
14. data편집(분석→분석화면-적분결과보기)
15. 크기조절 및 인쇄
16. 종료시에는 pump의 flow rate를 시작시와 반대로 내려준다.
17. pump, detector, module, computer off
실험 방법
1. 시료준비(각각 전개용액으로 묽힌 후, 주사기로 취해서, Filter로 불순물을 제거한다.)
2. uv detector on, pump on, module on
3. pump 조건 맞추기 → A 100% → flow rate 0.5ml/min 2초후 0.0ml/min
(A line열어주기 위해)
4. Air제거하기 → 'draw'로 용매 빼기 → 'run'으로 주사기 빼기 →2∼3번 반복
5. flow rate 지정 (isocratic : 등속도 용매)
0.2→0.4→0.6→0.8→1.0→1.2 까지 30초 간격으로 올려줌
6. detector 조건 [wavelength : 254nm, auto zero, Aufs : 0.8 (sensitivity)]
7. computer program, Autochro실행 (앞에 만든 디렉토리 삭제, 새로운 디렉토리 생성
(new→채널선택(1)→C:\autochro\inst\ → 분석시료 10개 → 확인)
8. 분석방법→데이터 수집 방법→수집비 (10), 수집시간 12분, 외부트리거 선택 후 확인)
9. Caffeine 표준물 injection (20㎕이상 취하며, bubble이 생기지 않도록 주의!!)
이동상으로 syringer washing 5회 → 시료로 washing 5회
syringer injection후 손잡이를 inject쪽으로 돌림(외부트리거)
10. 분석이 완료 될 때까지 기다린다.(프로그램의 왼쪽상단에 Channel 준비상태가 수집 중으로 바뀌었는지 확인한다.)
11. syringe filter로 걸러낸 시료 용액을 차례로 Injection
12. 분석화면보기 → data열기 → report → 파일의 미리보기 → 인쇄
12. 실험이 끝난 후 flow rate를 반대로 순차적으로 낮추면서 이동상을 20분간 흘려준다.
13. 기기 끄기, syringer washing, 주변정리
§ 액체크로마토그래피에 의한 정성 분석 §
- 결과 보고서 -
실험 목표
액체크로마토그래피를 이용하여 카페인 표준용액, 커피, 디카페인 커피, 녹차를 정성분석 할 수 있다.
시약 및 기구
Caffeine 표준용액, 커피, 디카페인 커피, 녹차, syringe filter system, beaker, 주사기, 이동상(MeOH : H2O = 80 : 20), C18 역상 칼럼, 100㎕ syringer, vial 20ml, HPLC, mass flask(500 ml)
실험 방법
1. 시료준비(각각 전개용액으로 묽힌 후, 주사기로 취해서, Filter로 불순물을 제거한다.)
2. uv detector on, pump on, module on
3. pump 조건 맞추기 → A 100% →
flow rate 0.5ml/min 2초후 0.0ml/min
(A line열어주기 위해)
4. Air제거하기 → 'draw'로 용매 빼기 →
'run'으로 주사기 빼기 →2∼3번 반복
5. flow rate 지정 (isocratic : 등속도 용매)
0.2→0.4→0.6→0.8→1.0→1.2 까지 30초 간격으로 올려줌
6. detector 조건 [wavelength : 254nm, auto zero, Aufs : 0.8 (sensitivity)]
7. computer program, Autochro실행 (앞에 만든 디렉토리 삭제, 새로운 디렉토리 생성
(new→채널선택(1)→C:\autochro\inst\ → 분석시료 10개 → 확인)
8. 분석방법→데이터 수집 방법→수집비 (10), 수집시간 12분, 외부트리거 선택 후 확인)
9. Caffeine 표준물 injection (20㎕이상 취하며, bubble이 생기지 않도록 주의!!)
이동상으로 syringer washing 5회 → 시료로 washing 5회
syringer injection후 손잡이를 inject쪽으로 돌림(외부트리거)
10. 분석이 완료 될 때까지 기다린다.(프로그램의 왼쪽상단에 Channel 준비상태가 수집 중으로 바뀌었는지 확인한다.)
11. syringe filter로 걸러낸 시료 용액을 차례로 Injection
12. 분석화면보기 → data열기 → report → 파일의 미리보기 → 인쇄
12. 실험이 끝난 후 flow rate를 반대로 순차적으로 낮추면서 이동상을 20분간 흘려준다.
13. 기기 끄기, syringer washing, 주변정리
실험 결과
결과
분석
카페인 표준시료
커피(카페인)
결과
분석
녹차
커피(디카페인)

키워드

기기분석,   기기분석실험,   액체크로마토그래피,   액체크로마토그래피에의한 정성분석,   정성분석,   HPLC,   High Performance Liquid Chromatography