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단백질의 검출
1. 실 험 목 적
2. 배 경 지 식
① 단백질(Protein)
② 확인반응
1) 밀론반응(milon's reaction)
2) 크산토프로테인반응(Xanthoprotein reaction)
3) 뷰렛반응
4) 닌히드린반응(Ninhydrin reaction)
3. 재료 및 기기
1) 기구
2
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반응은 펩티드 결합 부위를 인식하기 때문에 아미노산으로만 이루어져 있는 histidine은 반응을 보이지 않았고, 단 백질로 이루어진 우유는 펩티드결합 부위가 있으므로 반응을 보여 보라색을 띄었다.
닌히드린은 아미노산, 단백질의 알파아미
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단백질들이 존재하고 있으며 그들의 화학적 및 물리적 성질은 서로 다른 경우가 많아 정제 및 정량을 하는데 공통으로 사용할 수 있는 한 가지 방법이란 없다. 1. Ninhydrin 반응(닌히드린 반응) -단백질 정성 방법
2. Bradford법(브래드포드 법)
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드린과 반응하여 아미노산의 종류에 따른 특유한 색을 나타내기 때문이다. 예를 들면, histidine은 보라색, albumin은 오렌지색으로 변한다. 이때 닌히드린을 가열하는 이유는 단백질은 닌히드린 시약에 반응하지 않고 아미노산으로 분해되어야
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민과 녹말은 색이 변하지 않 았다. 뷰렛 반응에서 알부민과 우유의 색이 보라색으로 변하였다.
Ⅵ 고찰
albumin, starch, histidine, 우유로 뷰렛반응과 닌히드린 반응 실험을 하였다. 앞서 말한바와 같이 뷰렛 반응, 닌히드린 반응은 단백질을 검출하
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반응시킨 후 냉각시켜 정색반응을 관찰한다.
3. 실험결과
(1) 뷰렛반응
albumin 용액만 보라색으로 변했으므로 albumin이 단백질 인것을 알 수 있다.
(나머지 용액에서 나오는 연한 파란색은 CuSO4 시약의 색이다.-발색반응 아님.)
(2) 닌히드린 반응
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나타났으며 methionine ,albumin 이 비슷하였고 glycine, tyrosine 이 비슷하였다. (순서는 표의 순서대로)
● 6. 실험토의
단백질의 유,무를 판단하는 실험으로 얼마나 민감한지 민감도 테스트를 하는 원리인데 ninhydrin 수용액을 고작 5방울씩 쓴다고 시
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었다.
그러나 닌히드린 반응에서는 처음 접해보는 터라 여러 가지 문제점이 발생했다. 맨 처음 0.1% Ninhydrin solution을 20방울 넘게 넣고 나서야 가시적으로 반응이 나타났다. 그리고 젤라틴에서 반응이 나타나지 않은 것을 대조군인 증류수를 통
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두가 기질과 결합하여 효소 포화상태가 된다. 효소의 반응속도는 높은 기질농도에서 기질농도와 무관하고, 낮은 기질농도에서 기질농도에 비례한다.
2.Michaelis-Menten equation
기질농도 [S]와 초기속도 V0의 관계는 거의 모든 효소에서 같은 모양의
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반응에서 베네딕트용액은 포도당과 반응하여 황적색이 된다는 것은 중고등학교 과학시간을 통해 알수 있었던 사실이다. 기존에 알수 있었던 사실에 맞게 포도당과 베네딕트용액의 반응에서 적갈색의 반응물을 얻을 수 있었다. 베네딕트반응
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