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. 그러나 화학조성이 세균과 전혀 다르고 두터운 세포벽을 갖는 효모 또한 그람양성으로 염색된다는 점에서 그람염색반응이 세포벽의 화학조성과 직접적인 관계가 있는 것은 아니다. 그람양성반응은 세포벽의 화학조성이 아닌 물리적 구조
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그람염색
Catalase 시험
Oxidase 시험
［2주차］
생화학적 반응 시험
［3주차］
결과 보고
［4주차］
● Klebsiella / Enterobacter / Pneudomonas 특징과 차이점
셋 다 Gram negative 간균 이므로 감별이 중요 !
≪ 표 ≫
Klebsiella의 특
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염색하기 전에는 절대로 물로 씻어서는 안된다.
10. Results
우리는 그림 대신 폰으로 사진을 찍었다.
위의 사진은 우리 조의 실험결과이며 밑의 사진은 1조와 3조의 모범답안이다.
실험예상 결과
- 그람 양성균 : 보라색
- 그람 음성균 : 분홍색
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염색), 세척
⑤ Gram's iodine(1분간 고정), 세척
⑥ 95% ethanolㄹ 탈색시킴(알코올 방울방울 떨어뜨려 지나친 탈색을 방지), 세척
⑦ Safranin으로 염색(10~30초간), 세척 후 건조시켜 검경한다.
- 실험시 유의사항
① 그람 염색은 정확한 조작을 하여야
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이 위 음성균으로 판명될 수 있으므로 주의한다.
Counter staining (후염색) : Safranin 으로 30초~1분간 염색한다. 이때 이전 과정에서 탈색된 Gram (-)균이 pink~적색으로 염색된다.
Washing : 세균이 붙어 있는 면을 아래로 하고 그 뒷면에 수돗물이 2∼3초
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그람염색
- 슬라이드글라스를 알코올로 깨끗이 닦아 지방을 제거
- 슬라이드 글라스 위에 증류수를 한방울 떨어뜨린다.
- 배지에서 배양한 균을 소량 따서 슬라이드글라스 위의 증류수에 푼다. (공기중에서 건조)
- Crystal violet염색액을 충분
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. 이는 과잉의 시약을 제거하여 다음 시약의 작용을 정확히 하도록 도와주기 위함이다. 또한 정확한 그람염색을 위해서는 배양시간이 24시간이 넘지 않은 신선한 균주를 사용하여야 한다. 특히 그람 양성균은 배양시간이 경과함에 따라 1차 염
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으로 10초간 염색한 후에 슬라이드글라스 뒷면을 수세한 후 물기를 제거해주었다. 사프라닌으로 후염색하면 탈색된 그람음성균은 붉은색으로 재염색이 된다. 모든 염색과정에서 주의하여야 할 점은 너무 오래 염색해서는 안된다는 것이다.
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1.실험의 목적
2.실험방법
3.실험결과
4.결론
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oil을 떨어뜨려 현미경으로 관찰(100배 또는 1500배)한다. 1000배 이상의 고배율로 관시에는 빛의 산란을 막기 위하여 immersion oil을 사용한다.
5. 참고문헌
① 민경찬 외 7인, 식품미생물학실험, 광문각, 2000
② 오계헌 외 4인, 최신미생물실험, 신광
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