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DNA라도 이동하는 거리가 제각기 다르다. Size marker로 쓰는 짧은 DNA는 linear form이므로 전기영동으로 size를 비교할 수 있는 DNA는 linear form DNA 뿐이다.
2) Restriction enzyme mapping
분리한 DNA를 제한효소로 처리하여 원하는 DNA가 삽입되어 있는지를 확인
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DNA만 있어도 여러 가지 연구를 할 수 있게 되었다. 마지막으로 유전자 클로닝은 우리가 원하는 단백질을 선택적으로 대량으로 생산해내기 위해 사용되는 기술이다. 우리가 원하는 단백질을 생산하는 DNA를 제한효소와 연결효소를 사용하여 벡
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DNA를 발현시켜 단백질을 얻기 위해 viral promoter인 CMV / T7 / Sp6 / SV40 promoter를 사용하는 것이다.
2) Restriction Enzyme이 Star activity(비특이적 활성)을 일으킬 수 있는 조건을 생각해보고 이를 억제하기 위한 방법을 쓰시오.
→ Star activity란 제한효소가
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DNA에 아무 처리도 하지 않은 것이고, 가운데 두 종류는 PCR로 증폭시킨 sample에서 DNA가 있는 것(왼쪽)과 없는 것(오른 쪽)이며, 마지막으로 오른쪽 둘은 DNA에 제한효소 처리를 하여 원하는 크기로 자른 것이다.
7. 고찰과 결론
- 첫 실험에서는 결
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DNA 기술은 1953년 유전자가 DNA라는 사실과 DNA의 구조가 밝혀지면서 예견될 수가 있었다. 이 재조합 DNA 기술은 박테리오파지와 플라스미드에 관한 연구와 DNA에 작용하는 효소들, 특히 제한효소와 DNA리가아제에 관한 연구 등에 의하여 발견된 업
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DNA 기술은 1953년 유전자가 DNA라는 사실과 DNA의 구조가 밝혀지면서 예견될 수가 있었다.
이 재조합 DNA 기술은 박테리오파지와 플라스미드에 관한 연구와 DNA에 작용하는 효소들, 특히 제한효소와 DNA리가아제에 관한 연구 등에 의하여 발견된
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DNA)
1) 유전자재조합의 기술
2) 제한효소(制限酵素)
3) 식품 내의 DNA
4) 호모폴리머 테일링
5) 고등생물
6) 자연적인 미생물의 competence
4. 유전자 재조합(Recombination DNA)의 방법
1) 형질변환(transformation)
(1) 자연적인 형질전환
(2) 이종 간의
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DNA 프로필과 개인식별
- RFLP : 1980년 보스테인과 연구자들은 일정한 DNA를 제한효소로 절단하였을 때 생기는 단편이 개인마다 약간씩 차이 가 있음을 발견하였다.
- DNA 지문(DNA fingerprint) : 1985년 제프리스는 RFLP 기법을 이용하여 유전병과 관련된
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게 되어 해당 제한효소로 처리하면 vevor에 쉽게 연결 할 수 있다.
extra bases
( 3 nt)
restriction site (6 nt)
genomic DNA와 annealing site (18nt)
#Taq polymerase는 다른 중합효소와 달리 3\' -> 5\' exonuclease activity가 없어서 error rate가 상당히 높은 편이다. 농도가
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DNA, 즉 벡터로 사용할 박테리아 플라스미드와 외래 DNA를 분리한다.
② 플라스미드와 외래 DNA를 같은 제한효소로 처리한다. 사용된 제한효소는 플라스미드 DNA를 한 군데만 자르는 것으로 선택한 것이다. 제한효소에 의해 절단된 외래 DNA와 플
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