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대장균을 배양한 결과 대 장균이 배양되지 않았다.
2) Plasmid DNA 분리와 전기영동
<그림4. 전기영동 결과>
전기영동 결과 4kb DNA가 검출되었다.
Ⅳ. 논의
플라스미드 DNA는 박테리아와 일부 균에 존재하는 염색체 이외의 DNA 로 ‘작고 스스로
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DNA와 Plasmid DNA의 형태학적인 차이점을 설명하라.
2R-2. DNA농도를 측정하는 방법을 2가지 이상 설명하라.
2R-3. DNA를 염색하는 방법중에는 EtBr을 이용하지 않는 다른 방법들도 존재한다. 어떤 방법들이 있는지 설명하라.
2R-4. Chromosomal DNA와
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DNA and 8 μl of sterilized DDW with 2 μl of 6X loading
→ Total 12 μl!!
17) load onto an agarose gel
18) gel electrophoresis (~100V) for about 20 minutes
19) what do you see in the gel? check for the plasmid DNA band
20) store minipreped DNA frozen
Result
실험결과 모든 조의 DNA가 Marker의 5/6# ba
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대장균에 plasmid DNA를 넣는 방법으로는 chemical method이 있는데 Chemical method는 보통 CaCl2를 사용하여 대장균 세포막의 DNA 투과성을 증가시키는 방법이다. 전기영동으로 알아보는 뿐만 아니라 이렇게 실험해서 결과를 알아보고싶다.
원심분리기에
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것도 있는데 그것은 실험재료인 대장균자체에 Plasmid가 포함되지 않았었기 때문이다. 그리고 개중에는 Chromosomal DNA만 보이지 않는 결과도 있는데 그것은 아마 DNA를 풀어내고 다시 엉키게 하는 과정에서 역시 무언가 실수가 있었을 거라 본다.
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