흡광도에 대하여

소개글

흡광도에 대하여에 대한 보고서 자료입니다.

본문내용

100,000), 흡광도는 특정한 파장에서 측정되기 때문에 Beer의 법칙에 근거한 분석법은 특성적이고 예민하다.
②에서 농도 100μM인 riboflavin은 e = A/cl 로 계산할 수 있다. .
주어진 조건하에서 한 화합물에 대한 흡수스펙트럼을 얻기만 한다면 우리가 광도계로 분석한 대로 어떤 파장에서의 그 화합물에 대한 흡광계수를 계산할 수 있다. 가로축을 파장, 세로축을 흡광도로 하여 흡수스펙트럼을 그려보면 다음과 같다.
여기서 파장370nm, 450nm에서 각각 1.1, 1.25의 상위 흡광도를 얻었다.
색이 있는 화합물이 용액을 통과하면 빛의 특정 파장이 선택적으로 흡수된다. 결과적으로 생기는 색은 통과된 빛에 기인한다. 주어진 파장에서 흡수된 빛의 양을 도시한 것을 가지고 설명할 수 있다.
FICTURE 3. riboflavin(0.1 M 인산나트륨용액에서 22μM, pH7.06, 빛의 통과길이 1cm)의 흡수스펙 트럼.
riboflavin은 눈에는 노란색으로 보이는데, 이는 가시범위(400nm-700nm) 내에서의 유일한 흡수가 청색범위이기 때문이다.
(2)에서는 Erythrosin B, Eosin Y의 흡광도를 측정하고 흡수 스펙트럼을 작성하는 것이다. 흡광도(A)는 A = ecl으로 구할 수 있다.
Erythrosin B는 520nm, 530nm에서 최적 흡광도 1.17가 나왔다. Eosin Y는 400nm-540nm에서 ∞를 나타내었다. 그러므로 두 개의 샘플이 흡수파장 400nm-540nm사이여서 반사된(관측된)색이 자주색이었다.
가시광선 빛은 공유결합의 진동운동에 영향을 주지 않는다. 그러나 공유결합의 전자는 광자를 흡수하여 채워진 분자궤도함수로부터 높은 에너지 상태의 빈 분자궤도 함수로 전자전이를 일으킨다. 화합물이 흡수하는 자외선 혹은 가시광선의 파장은 화합물의 전자전이에 필요한 에너지의 양에 따라 결정된다. 많은 에너지를 필요로 하는 전자전이의 경우에는 보다 긴 파장의 빛이 흡수된다.
결과적으로 분광계로 관측한 결과 나타나는 넓은 띠들과 스펙트럼으로 알 수 있는 구조적 정보의 한계성 때문에, 가시광선 연구는 화합물의 구조적인 동정보다는 정량 분석에 많이 이용된다. 하지만 최대흡수 파장은 다른 광원으로부터 구한 정보와 보완하여 미지의 화합물의 구조에 관한 유용한 정보를 제공한다. 이번 실험에서 파장과 흡광도의 관계와 농도, 흡광계수, 흡광도를 측정할 수 있었으며 흡광기의 원리의 이해와 사용법을 익힐 수 있었다.
6. REFRENCE
생물과학을 위한 기기 분석 M.H.GORDAN 교보문고 1992. 11. 30 PAGE 137-145
Cooper, T. G, 1997, The Tools of Biochemistry, Wiley, New York.
Segel, I. H., 1976, Biochemical Calculations, 2nd ed., Wiley, New York.
Stenesh, J., 1984, Experimental Biochemistry, Allyn & Bacon, Boston.

키워드

INTRODUCTION,   MATERIALS,   METHODS,   RESULT,   DISCUSSION,   REFRENCE