목차
(1) E.coli cell로부터 DNA를 추출한다.
(2) 추출 절차를 숙지한다.
(2) 추출 절차를 숙지한다.
본문내용
250㎕ 넣고 3~4회 천천히 섞어준다.
(DNA가 손상되지않도록 주의)
③ buffer③ 용액을 350㎕ 넣고 바로 3~4회 천천히 섞어준다.
④ 원심분리기에서 13000RPM 으로 10분간 돌려준다.
(3) Plasmid DNA Purification
① 상징액 800㎕을 DNA Binding column에 옮기고, 13000RPM으로 1분간 돌린다.
② buffer④ 용액을 700㎕을 넣고 13000RPM 으로 1분간 돌린다.
(염류 및 수용성 잔해물 제거)
③ DNA Binding column을 새 tube에 옮긴다.
④ buffer⑤ 용액을 50-100㎕을 넣고 1분간 기다린다.
⑤ 용리시킨 Plasmid DNA를 13000RPM으로 1분간 돌린다.
Ⅳ. Result
추출한 Plasmid DNA 의 모습
Ⅴ. Discussion
개인적으로는 2번째 해보는 DNA 추출이었다. 버퍼용액 키트를 만드는 회사마다 다
다르므로 새로웠지만, sample에서 DNA를 추출하는 원리는 같으므로 실험에 잘 적응할 수 있었다.
Ⅵ. References
- http://biochemistry.yonsei.ac.kr/ 연세대학교 의과대학 생화학 분자생물학교실
(DNA가 손상되지않도록 주의)
③ buffer③ 용액을 350㎕ 넣고 바로 3~4회 천천히 섞어준다.
④ 원심분리기에서 13000RPM 으로 10분간 돌려준다.
(3) Plasmid DNA Purification
① 상징액 800㎕을 DNA Binding column에 옮기고, 13000RPM으로 1분간 돌린다.
② buffer④ 용액을 700㎕을 넣고 13000RPM 으로 1분간 돌린다.
(염류 및 수용성 잔해물 제거)
③ DNA Binding column을 새 tube에 옮긴다.
④ buffer⑤ 용액을 50-100㎕을 넣고 1분간 기다린다.
⑤ 용리시킨 Plasmid DNA를 13000RPM으로 1분간 돌린다.
Ⅳ. Result
추출한 Plasmid DNA 의 모습
Ⅴ. Discussion
개인적으로는 2번째 해보는 DNA 추출이었다. 버퍼용액 키트를 만드는 회사마다 다
다르므로 새로웠지만, sample에서 DNA를 추출하는 원리는 같으므로 실험에 잘 적응할 수 있었다.
Ⅵ. References
- http://biochemistry.yonsei.ac.kr/ 연세대학교 의과대학 생화학 분자생물학교실
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