[약리활성물질] 칼럼 크로마토그래피 분리 및 실험

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[약리활성물질] 칼럼 크로마토그래피 분리 및 실험에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 크로마토그래피
2. 컬럼 크로마토그래피
3. 겔 크로마토그래피
4. 이온교환 크로마토그래피
5. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피

본문내용

액체 크로마토그래피, 초임계 유체 크로마토그래피 등이 있고, 이들 크로마토그래피를 개량한 것은 HPLC, GC-MS, LC-MS, GC-IR 등이 있다.
원리와 종료
크로마토그래피는 고정상(station phase)과 이동상(mobile phase)을 이용하는데 혼합물의 성분들은 이동상의 흐름에 따라 고정상을 통해 이동되고 분리는 시료성분들 사이의 이동속도의 차이에 의해서 가능하게 된다. 그러므로 크로마토그래피법에서 분리되는 성분은 이동상에 녹아야 하고 고정상과 반응하여 녹아들거나 흡착되든지 또는 화학적으로 반응할 수 있어야 한다.
흡착 크로마토그래피는 분리하려는 성분을 흡착하도록 흡착제를 관에 채우거나 glass판에 엷게 바르고 시료는 용해하나 흡착제에 대한 성분의 흡착력과 용매에 대한 용해도의 차이에 의해 혼합물의 성분을 분리, 확인할 수 있다.
분배 크로마토그래피는 서로 혼합되지 않는 두 액상(고정상과 이동상) 중에서 어느 한쪽을 고정하고 다른 한쪽의 액상으로 전개시키면 시료중의 성분은 두 액상 사이에서 연속적인 추출과 용해가 반복되거나 성분의 분배계수에 따라 이동율에 차이에 의해 분리된다. TLC, C.C 및 GC 등의 크로마토그래피법은 고정상의 종류에 따라 분배 또는 흡착원리를 이용한다. 크로마트그래피의 종류에 따른 이동상과 고정상의 종류는 표 와 같다.
이동
이동상의 종류
고정상의 종류
고정상의 종류
기체·액체
기체
액체
관에 들어 있는 다공질 고체에 흡착시키거나 또는 모세관내벽에 흡착시킨다.
기체·고체
기체
고체
관에 충진하여 고정시킨다.
분배
액체
액체
관에 충진된 다공질 고체의 표면에 흡착시킨다.
흡착
액체
고체
관에 충진시킨다.
종이
액체
액체
두터운 종이의 다공질 구멍 내부에 함유시킨다.
얇은 막
액체
액체 또는 고체
유리판 위에 가는 가루를 고정시킨다. 때로는 십자표면에 액체를 흡착시킨다.
겔
액체
액체
고체중합체 내부에 함유시킨다.
이온교환
액체
고체
관에 충진한 가는 이온교환수지 입자
칼럼 크로마토그래피
칼럼 크로마토그래피는 충진제를 넣은 용기로서 관(column)을 사용하는 크로마토그래피의 총칭이며 혼합물시료가 충진제가 채워진 관내를 이동할 때 각 성분들의 이동속도의 차이에 의하여 분리되는 방법이다. 이 방법은 관내에 주입된 성분을 동일한 용매 혹은 다시 용출력이 큰 용매 또는 적당한 혼합용매로 전개를 계속함으로 흡착력이나 분배계수에 따라 성분이 분리된다. 충진제의 종류에 따라 겔 크로마토그래피, 이온교환 크로마토그래피, 친화 크로마토그래피 등으로 구분된다.
이 방법은 식품분석분야 뿐만 아니라 생화학, 약학, 의학분야에서 효소, protein, DNA, 탄수화물, 기타 생체물질 등 고분자물질을 분리, 정제시에 많이 이용되고 있다.
겔 크로마토그래피
겔 크로마토그래피는 시료중의 화학성분을 분자크기와 분자의 상태에 따라 분리하는 방법이며 분리는 관속에 다공질인 gel에 잡혀있는 용액상에 시료가 침투할 수 있는 정도에 의존한다. 즉, 겔의 다공질(pore)보다 큰 분자나 이온은 겔의 구멍을 침투하지 못하기

키워드

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