형광 (예비보고서)

소개글

형광 (예비보고서)에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험날짜
2. 이름
공동실험자
3. 실험목적
4. 실험원리
5. 시약 및 기구
6. 실험방법

본문내용

을 분리할 수 있다. 분광형광광도계에는 단색화장치가 두 개 있다. 두번째의 단색화장치는 가장 강한 형광의 파장의 선정이 이루어지게 한다. 다음에 형광방사선은 검출기에 도달한다. 그 형광신호는 세기가 낮으므로 증폭하지 않으면 안된다. 일반적으로는 광전자증배관이 쓰이며, 또 그의 출력은 외부의 전자회로에 의한 증폭기로 더욱 증폭이 이루어진다. 최후에는 일반적으로 전압계 또는 펜-잉크용 기록계가 사용된다.
▶ 응 용
형광광도법은 극히 광범위한 물질을 대상으로 하며 아주 저농도에서 정량이 가능한 점이 장점이다. 또한 들뜬 스펙트럼과 형광스펙트럼을 같이 쓸 수 있게 되므로 각종 물질의 분석 및 구조 연구에 이용될 수 있다. 형광을 내지 않는 물질도 어떤 방법에 의하여 형광성 물질로 바꾸어 측정할 수 있다. 최근 단백질 등의 고분자 화합물의 구조 연구나 단백질과 저분자의 형광물질과의 상호작용의 연구 등에 이용된다. 이때는 특히 여기광(勵 起光)을 편광(偏光)으로서 조사하고 형광의 선광도를 측정하는 방법이 잘 이용된다. 가시성(可視性) 형광은 주로 두가지 분류의 물질에 의하여 생기는데, 첫째는 광물 및 무기인화물이며, 둘째는 자외선까지 흡수하는 유기물 및 유기금속화합물이다. 특히 유기물 중에서는 분자가 크며, 고리를 많이 갖는 유기물이다. 예를 들면 thiamine(비타민 B1), riboflavin 및 tris-(5-methyl-1, 10-phenanthroline)-Ru(Ⅱ) 착이온 등이 있다.
5. 시약 및 기구
0.05 M Na2HPO4, Disodium forescein(uranine), 형광 cell, 파스퇴르 스포이드, 피펫, 비이커, 메스플라스크(500 ml, 100 ml), 저울, 황산지, 스펙츌라, 증류수
6. 실험방법
1. 모액 만들기
0.05 M Na2HPO4 in 증류수 - 500 ml 만들기
→ 위의 용액을 이용하여 1 mg/ml의 uranine을 녹인다.
→ 10 ㎍/ml uranine 용액(위의 용액을 1/100으로 묽힌다)
→ 0.1 ㎍/ml uranine 용액(위의 용액을 1/100으로 묽힌다)
* 용액은 항상 실험 시작전에 묽히고, 용액이 충분히 잘 섞은 후 묽힌다.
* 빛에 민감하므로 어두운곳에 보관한다.
* 용액을 묽힐 때는 반드시 증류수가 아닌 0.05 M Na2HPO4 용액을 사용해야 한다.
2. 형광분석기 ON(주의 110V임) - 10분간 Warim-up
3. 10분 경과 후, Computer On , Spectra Manager 실행
4. Spectra Measurement enter
5. Measurement - Parameter 설정 : measurement mode(Emission), Start (300), End (730), Scanning Speed(250), Sensitivity(Medium) 선택 후 OK.
6. 먼저 0.05 M Na2HPO4 을 Cell에 넣고, Auto Zero를 잡아준다.
7. Sample을 Cell에 넣고 Start(Sample을 Cell에 넣기 전에 증류수로 5번 이상 씻어낸 후 드라이기로 깨끗 이 건조시킨 뒤 사용한다.)
8. PL측정이 끝나면 Spectra Analysis가 나온다.
9. File에서 이름을 바꾼다.
10. Processing-Peak Processing-Peak Find enter
① Peak table enter
② Prant enter : Spectrum 위에 나오는 bar를 원하는 peak에 고정시키고 Add를 누르면 list에 peak 정보가 들어간다.
11. data나 spectrum을 출력하거나 저장
12. 형광분석기 OFF, Computer OFF

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