HPLC (예비보고서)

소개글

HPLC (예비보고서)에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
3. 시약 및 기구
4. 실험 방법

본문내용

module on
2. Detector 조건 맞추기(왼쪽 그림 참고)
- 사용할 Detector : Waters 486 Tunable Absorbance Detector
- Key 조작(조정이 필요한 Key를 누르고 수정 할 수치를 입력한 후 Enter Key를 누른다.)
λ(wavelength) : 254nm 선택
AUFs : 0.8 선택
Filter : 5초당 0.1로 처리
Auto Zero : 기기의 영점을 새로 잡아준다.
3) Pump 조건 맞추기
- Waters 600E Multisolvent Delivery System
- 용매지정(A part, MeOH: H2O=80:20) : A 100% 으로 설정 → flow rate 0.5ml/min 2초후 0.0ml/min
- Air제거하기→'draw'로 용매 빼기→'run'으로 주사기 빼기 →2-3번 반복
- Home Key와 방향키를 이용하여 Flowrate 를 0.2 ml/min씩 30초 간격으로 천천히1.2 ml/min까지 올린다.(0.2→0.4→0.6→0.8→1.0→1.2)
- 한시간 정도 이동상을 흘려주어 기기를 안정화시킨다.
4) Overall procedure
① uv detector on, pump on, module on
② pump setting
③ detector setting
④ computer program, Autochro실행
- 앞에 만든 디렉토리 삭제, 새로운 디렉토리 생성
- new → 채널선택(1) → C:\autochro\inst\ → 분석시료 10개 → 확인
- 분석방법 → 데이타 수집 방법 → 수집비 (10), 수집시간 12분, 외부트리 거 선택후 확인
⑤ Caffeine 표준물 injection - 이후, 이동상으로 syringer washing 5회
(20㎕이상 취하며, bubble이 생기지 않도록 주의!!)
⑥ syringer injection후 손잡이를 inject쪽으로 돌림(외부트리거)
- 프로그램의 왼쪽상단에 Channel 준비상태가 수집 중으로 바뀌었는지 확 인한다.
- 자동으로 프로그램에서 수집이 시작된다.
⑦ 분석이 완료 될 때까지 기다린다.
⑧ 다른 시료들도 앞선 과정과 동일하게 injection 한다.
⑨ 분석화면보기 → data열기 → report → 파일의 미리보기 → 인쇄
-실험이 끝난 후 flow rate를 반대로 순차적으로 낮추면서 이동상을 20분간 흘려준다. 그 후, 기기를 끄고 syringer washing, 주변정리한다.
5) Computer program setting
4. 컴퓨터 on, Autochro icon을 실행
5. Directory를 만들어 주고 실험할 시료 갯수를 정해준다.(새파일)
6. data수집 채널을 선택한다.(채널 선택)
8. 채널을 선택한다.(채널 1)
9. 실험조건을 잡아준다
10. 수집설정화면 및 메뉴의 아래화면
11. 수집설정의 오른쪽 화면 : 수집비(10)와 수집시간(12분), 외부트리거 선택 → 확인
12. 준비상태가 되면(Base line이 안정화) syringe를 이동상으로 5회 이상 washing해주고 sample로도 5회 이상 washing 한다.
13. 시료를 20㎕이상 취한다. ( bubble이 생기면 절대 안됨)- Injection port에 찌르고 트리거를 밑으로 (inject) 내린다. (syringe를 고무에 밀어넣는다는 느낌이 끝날 때까지 완전히 밀어준다.)
14. data편집(분석→분석화면-적분결과보기)
15. 크기조절 및 인쇄
16. 종료시에는 pump의 flow rate를 시작시와 반대로 내려준다.
17. pump, detector, module, computer off

키워드

HPLC (예비보고서),   분배,   흡착,   이온교환,   시료,   예비보고서