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2~3회 가볍게 세척한 후 destaining solution에 담아 탈색시킨다.
→ 이번실험에선 탈색과정을 따로 거치지 않고 착색 후 증류수에 넣어 전자레인지에 5분 정도 돌리기만 한다.
Gel을 전자레인지에서 꺼내 흰 종이 위에 올려 결과를 확인한다.
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pq=0&pid=RTbkDU5Y7uwssZd0LahsssssstG-452155&sid=UWGbInJvLCoAABb4seA
http://www.scienceall.com/dictionary/dictionary.sca?todo=scienceTermsView&classid=&articleid=255376&bbsid=619&popissue=
http://terms.naver.com/entry.nhn?cid=200000000&docId=1122975&mobile&categoryId=200000475
http://kin.naver.com/qn
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전기영동(electrophoresis)
(1) 전기영동의 정의와 원리
(2) 완충액
(3) Gel loading buffer
(4) DNA의 가시화(Visualization)
(5) 전류
7) PCR(Polymerase Chain Reaction)
(1) PCR이란?
(2) PCR에 필요한 재료
(3) PCR의 원리
(4) PCR-RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)
3. 실험 방
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3MM 종이에 달라붙은 gel을 건조기로부터 분리해 낸다.
9. 비닐랩을 제거한 후 자가방사하기 위해 암실에서 필름에 감광시키거나 실험자료로 보관한다 A. 배양세포로부터 단백질의 분리
B. 단백질의 정량
C. 단백질의 전기영동(SDS-PAGE)
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빠르지만 후자에 비해 분리해내는 능력이 떨어진다. 즉, 아가로스겔에 의해 분리된 밴드의 형태는 약간 모호하고, 밴드끼리 서로 멀리 떨어지는 경향이 있는데 이것은 아가로스 겔의 구멍이 상대적으로 크기 때문이다. 반면, 아크릴아미드겔
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DNA 형태(구조)에 따라 이동속도가 다르다. 일반적으로 supercoiled DNA가 가장 빨리, 그다음 linear DNA, open circular DNA의 순으로 빠르게 즉, 멀리 이동한다. 1R-1. 올바른 micropippette 사용법에 대해서 설명하라.
1R-2. 전기영동실험기법에는 수평형(ho
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는데, 이는 실험 과정 중에 오염이 있어 DNA가 잘렸거나 PCR 사용시 Primer가 제대로 작용하지 않았을 가능성이 있다. 하지만 확실하게 단정지을 수 없다. 원래는 전기영동실험시 band가 보이게 하기 위하여 형광물질을 첨가하는데, 이 형광물질은
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DNA를 섞은(1:5정도) solution을 주입한다.
5. 전기를 걸어준 뒤 20~30분 기다린다.
6. DNA가 내려오면 자외선 하에서 확인하다.
(10) 참고문헌
유전학실험서 - 한국유전학회 실험서 집필위원회 - 라이프사이언스
필수유전학 - Daniel L. Hartl, Elizabeth W. Jones
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3.전기영동(Electrophoresis)에 의한 DNA분리
4. 제한효소 (restriction enzyme)
5. E.coli : transformaion
6. 접합(Conjugation)
7. Transduction 형질도입-> bacteriophage
8. PCR(Polymerase Chain Reaction)
9. RNA isolation / DEPC solution / 주의점
10. Protein expression / SDS-Page / IPTG induction
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실험에서는 애기장대풀 (Arabidopsis thaliana)을 액체 질소를 넣고 갈아, CTAB과 isopropanol 침전을 이용하여 DNA를 추출하였으며 이렇게 얻은 genomic DNA를 PCR을 통해 증폭하여 전기영동으로 genotype이 Wild type인지 Homozygous 또는 Heterozygous인지를 확인하였
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