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gel의 polymerization 과정을 설명하라.
1R-4. 0.8%의 Agarose gel을 사용하여 크기는 같지만 여러 가지 다른 형태의 DNA를 분석하려고 한다. DNA가 circular covalently closed(Supercoil)형태, Open circular형태, Linear형태로 되어있을 때 예상되는 전기영동 거리를 설명
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DNA의 법칙/GBRAIN/TRANSNATIONAL COLLEGE OF LEX/2012/67p
-미생물학길라잡이/라이프사이언스/KATHLEEN PARK TALARO/현형환 외 5/2009/52p TITLE DNA 구조 관찰 및 제작 / DNA 추출 및 DNA 전기영동
-DNA의 구조 (dna structure)
-DNA 추출(dna extraction)
-DNA 전기영동하는 방법
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4. Purpose : 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과차이를 이해한다. Agarose gel에 DNA와 loading dye를 넣고 전기를 걸어주면 DNA는 인산기 때문에 매질을 타고 양전하 방향으로 움직이게 된다. 이때 움직이는 속도는 DNA의 크기에
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및 멸균
2.2. LB-Ampicilin 첨가
2.3. E. coli JM109 (pGEM-T-Easy-DXS, pBlueScript-KS(+)) 접종
2.4. Plasmid 분리
2.5. 제한 효소 절단
2.6. Agarose Gel 제작
2.7. 전기영동 및 DNA 확인
3. 결과
3.1. E. coli JM109 배양 확인
3.2. 제한효소 절단
3.3. Agarose Gel 준비
3.4. 전기
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DNA의 절단시 고려할 사항들
5) 대표적인 DNA절단 제한효소와 절단 인식자리
6) 전기영동(electrophoresis)
(1) 전기영동의 정의와 원리
(2) 완충액
(3) Gel loading buffer
(4) DNA의 가시화(Visualization)
(5) 전류
7) PCR(Polymerase Chain Reaction)
(1) PCR이란?
(2) PCR에 필
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전기영동과 분자량 측정
B. Agarose gel을 이용한 DNA의 전기영동
3. LDH의 활성 측정
4. Gel filtration chromatography를 이용한 LDH 단백질의 정제
5. Ion exchange chromatography를 이용한 LDH 단백질의 정제
Ⅲ. 결론 (결과 및 고찰)
1.
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DNA mar
ker를 이용하여 검정할 수 있다는 결론도 얻었다.
5. References
- 농림수산식품부(2008) 수박ㆍ멜론의 품종 지문화 연구 및 순도검정 마커 개발. 연구보고서 3-84
- 이계동(2003) 수박 F1 종자 순도 검정을 위한 DNA Marker 개발. 한경대 산업대학원
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갔을 경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했
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lab에서 인턴십
19/01~19/02
교내
이화여자대학교
인턴십
OOO 교수님의 Ewha Brain Institute에서 인턴십
19/06~19/10
교외
서울대학교
전국 대학생 생물학 심포지엄
노화 뇌에서 발생하는 세포노화(cellular senescence)의 매커니즘을 주제로 논문 리딩 및 포스
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