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의한 DNA분리
4. 제한효소 (restriction enzyme)
5. E.coli : transformaion
6. 접합(Conjugation)
7. Transduction 형질도입-> bacteriophage
8. PCR(Polymerase Chain Reaction)
9. RNA isolation / DEPC solution / 주의점
10. Protein expression / SDS-Page / IPTG induction
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Gene Cloning의 정의
Gene Cloning의 과정
Chymosin의 정의
Chymosin의 반응기작
Target DNA의 염기서열 파악
Vector 선택 및 Primer 제작
제한효소(Restriction Enzyme)를 이용한 절단
Target DNA와 Vector의 연결
숙주세포<E.coli >로의 도입 Part 1. 유전자 클로
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효소를 갖고 있고 과 산화수소를 무독한 상태로 바꾸어 버린다.
H2O2 +H2O2 ⇒ 카탈라아제 ⇒ 2H2O + O2
H2O2 + NADH +H+ ⇒ 슈퍼옥시드 디스뮤타아제 ⇒ 2H2O +NAD+ 1. 제한효소
2. 온도
3. 빛
4. 압력 : 대기압, 수압, 삼투압
5. 수소이온농도
6. 산화환
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ENZYMES (제한효소)
3) VECTORS
4) POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)
3. TECHNIQUES OF GENETIC MODIFICATION
1) INSERTING FOREIGN DNA INTO CELLS
2) OBTAINING DNA
3) SELECTING A CLONE
4) MAKING A GENE PRODUCT
4. APPLICATIONS OF rDNA
1) THERAPEUTIC APPLICATIONS
2) THE H
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제한효소를 이용하여 lambda DNA를 절단하고 그 결과를 전기영동을 통해 관찰하는 실험이었다. 그러나 실험 중에 오차의 원인이 되는 일들이 많이 발생하였다. 첫째는 tip을 꼽지 않고, 바로 시료를 취하려고 하여 피펫의 끝이 오염되었다. 그래
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실험목적
제한효소에 의해 잘라진 필요한 부분의
Insert와 Vector의 결과를 전기영동을
통해 확인한 후 Ligase를 통해서 Insert
와 Vector를 붙여주는 것이 목적.
실험원리
Ligation
DNA나 RAN의 끈을 이어주는 과정을
가리키는 용어이다.
이 반응에
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효소를 갖고 있고
과산화수소를 무독한 상태로 바꾸어 버린다.
H2O2 +H2O2 ⇒ 카탈라아제 ⇒ 2H2O + O2
H2O2 + NADH +H+ ⇒ 슈퍼옥시드 디스뮤타아제 ⇒ 2H2O +NAD+ 개요
※제한요인의 개념설명
1.온도
- 제한요인으로서의 온도 설명
1)내성범위
2
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? * 유전자 재조합
??? 한 생물의 유전자를 잘라내어 다른 생물의 DNA에 이식하여, 유전자를 이식 받은 개체의 형질이 달라지게 하는 현상 (인슐린 등)
?? ① 제한효소 (Restriction enzyme): 인위적으로 한 생물의 DNA를
잘라내는 역할
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1980, p 6380.
<5>, <6> M.J. Waring , \"Complex formation between ethidium bromide and nucleic acids.\", Journal of Molecular Biology 13 , 1965, (1): p 269282.
<7> Albert A-C, Spirito F Figueroa-Bossi N, Bossi L Rahmouni AR, \"Hyper-negative template DNA supercoiling during tran
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ansfection, infection(transduction)이 있다. 이들의 차이점은 무엇일까?
- Transfection: virus vector와 같은 것들을 이용하여 eukaryotic cell로 외부 물질을 주입하는 것으로 주로 mammalian cells에 쓰이는 용어이다. 또한 DNA introduction 의해 변화된 세포의 성질을 일
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