|
10배인 5ml의 양으로 wash를 해주어야 하는데, 한번에 5ml를 쓰는 것이 아니라 1ml씩 총 5번을 wash해준다. wash를 해줄 때에는 bead와 buffer가 다 뒤집힐 정도로 수직으로 강하게 분사한다. 강하게 분사하면 tip에 용액이 묻을 수가 있으므로 파이펫을
|
|
|
000
2,3-Butanedione
800,000
1-Iodobutane
1,500,000
n-Butanol
17
Chloroform
1,000,000
Chlorobenzene
1,200
CCl4
6,600,000
사용시 주의 사항 : 고순도(99.9995%)의 운반 가스를 사용하여야 한다. 만약 수분이나 산소 등의 오염물이 함유되어 있는 경우에는 감도나 직선성 범위를
|
|
|
원하는 밴드 외에 나타난 다른 단백질의 밴드를 없애기 위해 바꿔줘야 할 condition은 무엇일까?
Q2) Affinity chromatography 중에서
Ni-NTA vs. GST(glutathione S-transferase) →elution 원리의 차이
Q3) SDS-PAGE에서 APS, TEMED, sampling buffer조성
5.Reference
|
|
|
각각 일차원 페이퍼크로마토그래피를 행하거나, 또는 2차원 페이퍼크로마토그래피를 행하여 완전히 분리시킬 수 있다.
Ⅳ. 생물체생체내 아미노산분리 실험결과
1. 알라닌
- 아미노산의 이동거리 : 66mm
- 아미노산의 반전색깔 : 자색
2. 발린
-
|
|
|
전기적 신호로써 나타내주는 장치로, 현재 주로 사용되고 있는 GC용 검출기는 다음과 같다.
* 열전도도 검출기(TCD ; Thermal Conductivity Detector) - 운반기체 : He, H2
* 불꽃 이온화 검출기(FID ; Flame Ionization Detector) - 운반기체 : N2, H2
* 전자포착 검출기(E
|
|
|
도가 높고(~10-13g/s), 선형 감응범위가 넓으며(~107g), 잡음이 적다. 또 고장이 별로 없고, 사용하기 편하다.
* 단점 : 시료를 파괴한다.
시약 및 기구
에탄올, 아세톤, 미지시료(에탄올 + THF 혼합물), syringe, Vial(4개), Kimswipes, GC
실험 방법
**실험하는
|
|
|
로테인 A, 프로테인 G, 글루타티온-S-전이효소(GST), His6 등이 있다.
■사용법
: 이들 융합단백질은 친화 크로마토그래피(affinity chromatography)를 이용하여 분리할 수 있다. 목적 단백질의 N-말단에 GST를 결합시킨 경우 GST의 기질인 글루타치온 고정
|
|
|
은 시료성분이 분리관 상단에 얇은층으로 흡착된 다음 치환반응이 일어날 수 있는 치환제용리액으로 용리할 때 치환반응이 빠르게 일어나는 성문은 먼저 용출되고 느린 치환반응 성분은 느리게 용출되어 분리된다. 프론트 크로마토그래피는
|
|
|
chromatography)의 약자로 과학실험을 할 때 쓰는 기기이다. 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)라고도 한다. 보통의 액체 크로마트그래피에서 입자를 더욱 작게하고 가는 분리관을 사용해 알맞은 압력을 가하며 용매를 흘리면 기체 크로마트그래피
|
|
|
chromatography)의 약자로 과학실험을 할 때 쓰는 기기이다. 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)라고도 한다. 보통의 액체 크로마트그래피에서 입자를 더욱 작게하고 가는 분리관을 사용해 알맞은 압력을 가하며 용매를 흘리면 기체 크로마트그래피
|
|
메뉴펼치기
