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blotting을 수행할 때 왜 SDS-PAGE를 사용하는 것일까? 기본원리는 cell extracts로부터 특정 protein을 detection하기 위해서 먼저 gel electrophoresis를 이용하여 size 별로 분리해 낸다. 이 과정에서 protein을 순수하게 size별로 분리해내기 위해서, protein을 단위
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하여 그 다른 동물에게도 혈철을 얻어낸다. 동물 1에서 얻은 혈청에는 primary Antibody가 들어있고, 동물 2에서 얻은 혈청에는 동물1의 protein에 결합하는 secondary Antibody가 들어있어 항체를 얻을 수 있다. western blotting에서 이런 두 단계의 Antibody를
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CREB(대장균 CREB)
동일한 위치(약 43kd)에서 띠 관찰
양 세포에서 상당히 많은량의 CREB 발현 의미
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blotting applications to physiological research., Scandinavian journal of medicine & science in sports, pp 4-25.
·Meftahi, et al., 2021, Applications of western blot technique: From bench to bedside., Biochemistry and Molecular Biology Education, pp 509-517.
·Kobayashi, et al., 2019, Cell sheet tiss
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blotting에서 발생된 빛은 고정된 항원에 도달하고 이것이 사진으로 검출되는 것이다.
※ 1차 항체의 affinity와 specificity가 좋다면 1차 항체에 직접 peroxidase나 alkaline phosphatase 등의 효소를 직접 cross-link하여 사용해 볼 수도 있을 것이다.
5. Reference
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