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(2) HPV의 DNA 검출
(3) HPV의 RNA 검출
(4 )PCR-SSCP 법을 이용한 유전자 다형성 검출 PCR(polymerase chain reaction, 중합효소 연쇄 반응)
1. PCR이란:
2. PCR의 단계
3. PCR의 구성요소
4. Studying PCR products
5. PCR의 종류
6. PCR의 용도
7. 사용증례
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실험 목적
2. 실험 이론
▣ PCR(Polymerase Chain Reaction, 중합효소 연쇄반응)의 원리
▣ PCR Cycle
➀ DNA의 변성 (Denaturation)
② Primer의 결합 (Annealing)
➂ DNA의 합성 (Extension)
3. 실험 방법
* 실험 기구 및 시약
4. 실험 시 주의사항
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효소 올리고탐침이다. 다른 방법으로는 한 쌍의 HybProbes와 LightCycler를 사용한 방법들이 특히 미생물의 검출과 유전자형 분석에서 중요해지고 있다. 또한 바이러스-검출용 실시간 PCR가 다른 미생물 분야보다 더 많이 문헌에서 찾아볼 수 있다.
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PCR의 원리 및 순서
중합효소 연쇄 반응(Polymerase chain reaction)
PCR법에 의해 세포·조직에서 아주 미량의 DNA를 추출해 특정영역 DNA를 증폭해 유전자 진단 등에 이용하는 것이 가능하다.
주형이 되는 double strand DNA의 표적 부분의 양끝 염기
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중합하는 과정에 필요한 효소로, PCR의 과정에서 가열과 냉각이 반복되기 때문에 90°C 이상의 고온에서도 활성을 잃지 않는 효소를 사용한다. DNA의 5’에서 3’ 으로 합성하고, 3’에서 5’ 으로 잘못된 염기를 교정하는 능력을 가지고 있다.
Fig
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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PCR의 기본 원리
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p746-748
Watson, Baker, Bell, Gann, Levine, Losik // 2010년 2월 18일 // 왓슨의 분자생물학 6판//p748 Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
Disc
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PCR과정에 대해서 말해주세요.
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학부시절, 가장 좋아했던 과목은 무엇인가요?
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엑셀실력은 어느정도 인가요?
36
어노테이션은 어떻게 하는가?
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당신의 열정을 사례를 들어 증명해보세요.
38
글로벌 유전자 분석회사들이 어떤 곳이 있는지
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