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표현되며, 즉 투과율의 음의 상용로그 값으로 정의된다. 일반적으로 물체에 빛을 흡수하는 입자가 많다면 투과되어 나오는 빛의 세기는 줄어들기 때문에 흡광도는 물질의 농도에 영향을 받고, 또 입자가 어느 정도의 빛을 흡수하느냐에 따라
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. 그러나 거품, 단백질의 변성, 침전들이 일어나 일반적으로 사용되지 못하는 단점이 있다. 1. DNA구조
2. 전기영동이 되는 이유?
3. 미생물배지
4. 항생제의 개념과 플라스미드를 넣는 이유?
5.solution 1,2,3 기능
6. Cell-lysis 방법 3가지
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DNA와 달리 intron은 존재하지 않는다. 이와 같이 거의 순수하게 유전정보를 갖고 있는 cDNA를 합성한 뒤 plasmid 등의 vector에 끼워 bacteria에 도입한다. Bacteria는 체내에 들어온 이종 DNA의 유전정보를 그대로 발현하여야 하는데, 대개 이를 검정하기
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oli을 Ca2+ 이온 존재 하에 놓아두면 foreign DNA(plasmid, phage 등)를 세포 안으로 도입할 수 있는 competent상태로 되고, 이 상태의 세포를 competent cell이라 한다. 이때 사용하는 E.coli host cell을 competent cell이라고 부른다. 실험을 대략적으로 보면 우리는
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70~74℃에서 polymerase에 의해 DNA를 합성한다.
위 3개 단계를 한번 반복하면 반복하기 전보다 2배의 DNA를 얻을 수 있다. 이 과정을 여러 번 반복하여 소수의 DNA를 증폭시킬 수 있는 것이다.
5. 실험 재료와 방법
① 실험 재료
Agarose gel, EtBr, TAE buffer,
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멸균증류수, 37도 진탕 배양기, EP튜브, 페트리 디쉬, 폴리글러브
실험 방법
Competent E. coli cell 100㎕+재조합 plasmid 10㎕
Ice 5min
Heat shock 1min at 42℃ (시간 중요!!)
Ice 3min
Add LB broth 1000㎕ and reaction 40min at 37℃
Plating on LB+ampicillin plate
Incubate in 37℃ incubat
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바나나, 브로콜리 DNA 추출 실험에서 DNA 손상으로 인한 한계를 느낌.
이에, PCR과 Cloning, 전기영동 실험을 계획.
블로팅과 유전자치료에 관심을 가지게 됨.
배경지식(
플라스미드란?
벡터란?
왜 플라스미드를 벡터로 가장 많이 이용하는
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I. 실험 목표
Plasmid DNA는 bacterial cell의 소기관으로서 transformation 등 다양한 곳에 사용된다. 본 실험은 다양한 실험에 필요한 plasmid DNA만을 얻는 mini-prep 실험을 진행하고, nanodrop 기기를 통해 정제한 plasmid DNA sample의 순도를 측정하는 것을 목표
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DNA를 Modification enzyme을 이용해 메틸화시켜 두기 때문에 자신의 제한효소가 인식하지 못하게 하기 때문에 DNA만을 절단할 수 있다.
마지막으로 이론적으로 PCR에서 얻을 수 있는 증폭된 DNA의 크기를 알아보자. PCR 실험에 사용한 plasmid DNA는 유전
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DNA를 도입시킨다. 이 경우 약간의 세포들은 죽으나 나머지 살아있는 세포들은 안정하게 형질전환된다.
식물세포에 재조합 DNA를 더 효과적으로 도입시키기 위한 벡터는 토양미생물인 아그로박테리움의 Ti 플라스미드이다. 자연상태에서 아그
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