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DNA 및 유전자 발현의 전자현미경 관찰. 박민희, 조선대학교 기초과학연구소. 1989. 自然科學硏究 Vol.12 No.1
Electrostatic Force Microscopy Plasmid DNA의 전기적 특성 관찰. 이남주 명지대학교 자연과학연구소. 2004 자연과학논문집 Vol.23 No.-
DNA의 변화가 어
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1. 실험목적 : Plasmid의 정제과정을 배우고 직접 실험을 통해 학습 하기 위해서 실험을 진행한다.
2. 실험장비 및 시약 : Micro tube, Sol.1, Sol.2, Sol.3용액, Rack, Pipet, Centrifuge, Washing용액, Ilution buffer ,Column, Control용액,Cath2용액, DF8용액
3. 실험 방법
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pre-report와 result report 두 개의 파일로 되어 있습니다.
가. 박테리아와 Plasmid DNA
박테리아는 Monera계에 속하는 생물로서, 지구환경 어디에서나 살고 있는 매우 작고 가장 많이 번성한 생명체이다. 땅, 물, 공기와 같은 와부환경 뿐만 아니라 사
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plasmid라고 생각하고 더블컷(EcoR I와 Pst I를 처리해준다)을 했을 때 나오는 밴드를 아래의 format에 그려보겠다. EcoR I이 처리되면 삽입되어 있던 ssbp1이 잘려 나오고, pGEX-4T-1 vector의 EcoR I 절단 자리가 잘린 상태로 유지된다. 그리고 Pst I이 처리되
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않는 것도 있는데 그것은 실험재료인 대장균자체에 Plasmid가 포함되지 않았었기 때문이다. 그리고 개중에는 Chromosomal DNA만 보이지 않는 결과도 있는데 그것은 아마 DNA를 풀어내고 다시 엉키게 하는 과정에서 역시 무언가 실수가 있었을 거라
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DNA & Measure DNA
2. 실험 이론 및 원리
Ⅰ. DNA란 무엇인가?
Ⅱ. Genomic DNA, Plasmid DNA, cDNA 차이
Ⅲ. DNA 분리법 및 여기에 사용되는 시약 및 작용 원리
1) 실험 과정
2) P/C/I (Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol) 용액의 특성
3) Ethanol 또
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DNA)
- 농도는 1ug/100ul까지 가능한데 대개 0.4ug/100ul의 농도로 사용하면 증폭이 잘
된다. 처음에는 충분한 양으로 시작하여 원하는 결과가 나오면 DNA양을 차차
줄여 반응을 최적화 한다.
- plasmid가 genomic DNA보다 훨씬 PCR이 잘되며 일반적으로 50-500b
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ice, Principles of Life, Sinauer Associated, Inc & W.H. Freeman and Company, 2012, p.231-235, 244-262
2) Birnboim, H.C. and Doly, J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucleic Acids Research 7, 1979, p.1513-1523
3) Joseph Sambrook, David W. Russell, Molecula
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Plasmid(HSP)는 426호 냉동고에 있다.
3. Amp는 412호, 426호 냉동고에 보관되어 있다.
4. Ice bath용 얼음은 410호 뒤편에 있다.
5. Transformation할 때 42℃ water bath는 426호 것을 사용하고 실험시간 전에 미리 켜둔다.
6. Colony와 고체배지는 앞 분반이나 앞 조에
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plasmid 를 추출하는 일반적인 방법
기본원리 세포내에 DNA는 일반적인 double-helix를 형태를 가지는 반면 plasmid는 supercoiled형태를 가짐으로써 PH의 변화에 따라서도 plasmid의 형태 와 구조가 크게 변하지 않는 것을 이용하여 순수한 plasmid만을 추출
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