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DNA(ex: 외래 유전자를 삽입한 플라스미드)를 대량 생산을 목적으로 한다. mini-prep 에서는 E.coli에 넣은 gen을 빼내는 것을 목적으로 한다.
3. 실험 재료 : E.coli, centrifugation, 여러종류의 buffer(아래 실험방법 및 순서 참조), etube, filter... etc..
4. 실
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DNA ligase 는 T4 DNA ligase와 비교할 때 blunt-ended DNA에 작용하는 힘이 약하므로 일반적인 유전자 재조합 과정에서는 T4 DNA ligase를 더 많이 사용하는 경향이 있다. intro..
형질 전환(transformation)
Vector의 기능
PLASMID
PCR
Polymerase
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eriophage를 통해 전달된다. 세균과 세균 사이에 내성유전자가 전달되는 방법에는 conjugation (intercellular passage of plasmid or transposon), transduction (DNA transfer via bacteriophage), transformation (uptake of naked DNA)가 있다.
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Plasmid vector
Gene cloning에 Plasmid vector가 사용되는 이유
1) 세포 내에서의 자가복제(self-replication)기능
박테리아 세포 내에는 박테리아가 고유하게 가지고 있는 chromosomal DNA는한 세포당 하나밖에 있을 수 없다. 그런데 vector는 복제하여 수많은 cop
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DNA 흡수
1.3 흡수된 DNA의 결합
2. 형질도입(transduction)
2.1 일반형질도입
2.2 특수형질도입
2.3 미완성 형질도입
2.4 파아지 전환
3. 플라스미드
4. 플라스미드의 종류와 그들의 생화학적 중요성
4.1 F와 I pili
4.2 내성 전달 인자(R인자)
4.3
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plasmid이다. Ti plasmid는 soil bacteria인 Agrobacterium tumefaciens에서 얻었는데, 식물에서의 일종의 tumor를 유발하는 유전자이다. Ti plasmid는 감염에 필요한 유전자와 감염 후 증식하기 위한 유전자로 구성된다. Ti plasmid의 특정 부분인 T-DNA(tumor-inducing DNA)
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더 많이 형성된다. 코스미드 벡터의 크기는 2.5kb이로 작고, 그것들이 숙주세포를 감염하여 포장된 후에 cos 부위가 37에서 52kb까지 분리되면, 커다란 외래 DNA를 삽입체로 수용한다. 대체로 35에서 45kb가 코스미드 벡터로 클로닝될 수 있다.
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plasmid 와 Ti-plasmid를 비교 설명하시오.
3. Agrobacterium spp.에 감염된 식물세포의 특성은 무엇인가.
4. Agrobacterium의 T-DNA의 식물세포내로의 전달과정을 설명하시오.
5. Soybean의 cotyledonary node를 이용한 Agrobacterium spp.에 의한 형질전환을 설명하시오.
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DNA primer를 합성하고 환자에게서 채취한 DNA를 template 로 하여 표적 유전자를 PCR법으로 증폭시키고 염기배열 해독용 플라스미드 백터에
클로닝하여 염기배열을 직접 해독한다. 그 염기 배열을 정상 유전자와 비교해 변이를
검출하는 방법이다.
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um acetate, pH 5.2 용액을 1/10 부피로, ethanol을 2.5 부피로 첨가
하고 -20°C나 -70°C에서 20분 이상 둡니다. 이 용액 속에서 핵산은 상당히 안정하기 때
문에 DNA나 RNA를 오래 보관하고 싶으면 이런 상태로 두기도 합니다. Sodium acetate
용액의 pH는 5.2 짜
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