|
크로마토그래피.
- 지름 1~10cm, 길이 0.3~10cm 인 칼럼에 고정상을 질량비로 목적물
의 수십배 이상을 가하여 유기용매를 이동상으로 한다.
- 주로 저분자 유기화합물, 특히 색소 등을 분리, 정제하는데 쓰인다.
겔투과 크로마토그
|
|
|
크로마토그래피는 정전기적 인력을 이용한다. 둘째로 역상크로마토그래피와 소수성 크로마토그래피는 소수성 상호작용에 의한다. 분자체는 겔여과, 크기배제크로마토그래피라고도 한다. 겔상태의 충진제입자의 내부로 삼투하기 쉬운 정도
|
|
|
on volume 된다.
Void volume 인 Vo는 겔 분자체 주위에 있는 용매가 차지하는 공간으로 일반적으로 겔 베드 총 부피(Vt)의 약 35%가 된다. 우리가 사용한 컬럼은 염료(dye)인 blue dextran (MW 2000)으로 Vo를 보정(calibration)하여 Vt=90ml , Vo=40ml 이 된다. Elution volu
|
|
|
량을 사용하여 측량을 반복해서 실험하면 알 수 있을 것이다. 첫 번째 샘플이 총 주입되는 질량 과 두 번째 질량 이 있다고 가정하면, 어떤 에서 두 개의 몫과 비교하면 다음 두 식이 산출된다.
위 두 식을 합치면
과 같이 나타낼 수 있다.
이러
|
|
|
겔이 마르지 않도록 계속 용리액을 서서히 흘려주면서 색소가 분리되는 것을 관찰한다.
● 시약 및 기구
실험A. 얇은 층 크로마토그래피에 의한 색소의 분리(정상 크로마토그래피)
100 mL 비이커, 시계접시, 모세관, TLC 판(폭 4 cm, 높이 6 cm 정도)
|
|
|
크로마토그래피를 이용한 색소의 분리(정상 크로마토그래피)
10 mL 주사기, 거름종이, 솜, 피펫, 유리막대
실리카 겔, 전개제(1-부탄올과 NH3 를 6:2로 혼합한 용액)
실험 방법
1. 얇은 층 크로마토그래피에 의한 색소의 분리(정상 크로마토그래피)
|
|
|
크로마토그래피 기법을 예로 들어 설명해 주시겠습니까?
단백질 정제에는 이온교환, 친화크로마토그래피, 겔 여과 등이 사용됩니다. 예를 들어, 친화크로마토그래피는 단백질이 특정 리간드와 결합하는 특성을 이용하여 고순도의 단백질을
|
|
|
투과전자현미경(TEM)
투과전자현미경 에서는 고에너지를 갖는 전자선이 전자렌즈계를 거쳐 시료를 통과하여 형광판에 상을 맺게 되므로 그 시료는 극히 얇아야 된다는 것을 전제조건으로 하고 시료의 밀도, 두께등의 차이에 따른 명암(contrast)
|
|
|
크로마토그래피를 이용하여 측정하고자 한다.
① 크로마토그램 출력시 크실렌이 가장 나중에 분리된다.
② 메틸렌클로라이드 등의 용매로 추출하여 분석한다.
④ 검출기로는 불꽃이온화 검출기(FID)를 많이 사용한다.
90. 인도페놀법으로 암
|
|
|
투과셀에 담겨져 있는 용액의 흡광도이다.
이것을 람버트비어의 법칙이라고 하는데
람버트 비어의 법칙에는 제약이 있다. (이거도 중요)
1) 용질간 상호작용 농도( 농도 < 0.01M )
2) 겉보기 화학편자
3) 다색 복선에 의한 겉보기 기기편차
4) 기
|
|
메뉴펼치기
