순수분리배양법

소개글

순수분리배양법에 대한 보고서 자료입니다.

목차

1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 실험목적
4. 시약 및 기기
5. 실험원리
6. 실험방법
7. 실험결과
8. 고찰

본문내용

경우 여러 가지 생장인자가 모두 포함되어 있는 물질, 즉 육즙, 효모즙, 염통이나 뇌즙, 야채즙, 맥아즙 등을 사용한다. 좀 더 까다로운 영양물질을 요구할 경우에는 혈청, 혈액, 복수와 같은 조직액을 첨가하거나, 살아 있는 세포에 접종하여 배양하기도 한다.
배지의 종류는 구성 성분, 성질, 실험의 목적에 따라 여러가지고 구분한다. 미생물이 요구하는 모든 필수 영양소를 그 조성에 따라 순수한 화학약품으로 만든 배지를 합성배지(synthetic medium)라고 하고, 동.식물의 조직이나 기관 또는 미생물체의 가수분해 산물이나 추출물을 시약과 혼합하여 만든 배지를 복합배지(complex medium)라고 한다. 복합배지는 정확한 배지성분의 조성을 모르기 때문에 증식용 배지로 많이 사용된다.
실험의 목적에 따라 배지를 선택배지(selective medium), 성상확인배지(differential medium), 증균배지(enrichment medium)로 구분하기도 한다. 선택배지는 배지내 염료나 항생물질 또는 특수 화학물질을 첨가하여 특정한 미생물만 생장하도록 만든 배지이고, 성상확인 배지는 염료나 지시약 또는 특정 화학약품을 배지에 첨가하여 특정한 효소반응이나 그 균의 특성을 쉽게 판별할 수 있도록 만든 배지이고, 증균배지는 화학약품의 첨가나 환경조건의 조정하여 다른 종류의 미생물의 생장은 억제시키고 특정한 미생물의 생장만 촉진하도록 만든 배지이다.
또한 배지는 그 성상에 따라 액체배지, 고체배지 및 반고체배지 등으로도 구분된다. 액체배지는 균체의 증식이나 생화학적 시험 또는 대사산물을 얻는 데 사용된다. 고체배지는 평판배지, 사면배지 및 고층배지가 있는데, 이들은 모두 미생물의 순수분리와 보존용으로 많이 쓰인다. 반고체배지는 운동성 실험과 미생물의 보존목적에 이용되고 있다. 배지의 고형화에 쓰이는 물질로는 한천(agar), 젤라틴(gelatin), 실리카겔(silica gel),계란알부민(egg albumin), 감자 및 혈청 등이 있다. 이 중에서 한천은 배지의 성분변화에 영향을 주지 않을 뿐만 아니라 미생물의 영양원으로 이용되지도 않고 44 C이상에서 녹고, 미생물의 생육온도 범위내에서 투명한 겔로 되기 때문에 배지의 고형화 재료로서 가장 널리 사용되고 있다.한천 고체배지는 만들들기 위해서 사용되는 한천의 농도는 계절에 따라 다소 차이가 있으나 대체로 1.5-2.0%이다.
일반적으로 배지는 물에 잘 녹는 물질로 만드나 배지의 조성에 따라서는 금속침전물이 생기는 경우가 있다. 이를 방지하기 위하여 EDTA(ethylenediamin tetraacetic acid)같은 킬레이트제(chelating agent) 를 첨가한다.
6. 실험방법
선상도말평판법은 혼재된 균을 평판배지의 표면에 획선도말하여 균을 순수 분리하는 방법중의 하나로 널리 이용되고 있다.
① 배양균을 멸균한 백금이로 떠낸다
② Nutirient agar plate를 뚜껑이 아래로 오도록 뒤집은 후 배지가 있는 평판의 바닥부분을 왼손으로 비스듬이 기울여 백금이로 식균한다.
③ 다시 뚜껑위에 놓고 백금이를 화염멸균한다.
④ 백금이를 접종하지 않은 배지의 가장자리에 찍어서 식힌다.
⑤ 평판배지에 선상도말하여 균을 희석 식균한다.
⑥ 선상도말한 Nutirient agar plate를 37 에서 24~48시간 배양한다.
⑦ 배양한 후 나타난 집락이 하나씩 떨러져 있는 가를 관찰하고 또한 그 집락의 형태를 구분한다.
7. 실험결과
8. 고찰
도말평판법은 무엇보다도 streaking이 가장 중요한 것 같다. 알코올 램프로 살균한 백금이에 적당한 규을 묻여서 준비된 petri dish에 겹치지 않게 선을 그어야한다. 이때 너무 세게 선을 그을 경우 배지가 찢어지는 경우가 생길 수 있고, 너무 촘촘히 선을 그을 경우 배양된 균이 형성한 집락을 제대로 관찰할 수 가없다. 우리가 한 세 개의 균중에 한 개는 균의 집락을 관찰하기 용이하였으나, 나머지 두 개의 경우는 백금이에 묻어 나온 균의 양이 작아서 인지 일부분에만 배양이 되고 나머지 부분은 배양이 되지 않았다. streaking을 할 때 적절한양의 균이 일정한 선을 유지하며 그려져야지 배양이 잘 된다는 것을 알았다. 배양된 균의 모양을 확인한 결과 각기 모양이 다를 뿐 아니라 집락 형성의 크기도 각기 달랐다.
유의할점은 배양기에 petri dish를 넣을 때 바닥이 위를 향하도록 넣어야 수증기가 올라와서 세균에 곰팡이가 생기는 것을 방지할 수 있다.

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