본문내용
1. Subject
Bradford를 이용한 단백질 정량
2. Purpose
Bradford방법은 단백질에 발색제를 가하여, 시료의 발색정도와 표준용액의 발색정도와 비교하여 단백질을 정량하는 방법이다. Bradford용액에는 coomassie brilliant blue G-250이 들어 있는데, 이는 dye역활을 하며, 단백질과 결합한다. 대체로 염기성과 방향성 아미노산과 결합하는데 이때 dye의 최대흡광도는 465nm에서 595nm로 이동한다. 따라서 붉은색에서 푸른색을 띄게 되는데, 이는 단백질의 농도가 높을 수록 더 잘 일어난다. 즉 이같은 색 변화로 단백질의 농도를 알아 보기 위한 실험이다(네이버 블로그, 2011).
3. Material & Reagent
3.1 도구/ 기구
• Micro tubes
• 피펫
• 원심분리기
• 얼음
• 분광광도계
• 클린벤치
• 70% 알코올
• 실험용 일회용 장갑
3.2 시약
• Cell lysis buffer (Triton, phosphatase and Protease)
• Protease inhibitor
• Breadford
• 실험 Cell
Bradford를 이용한 단백질 정량
2. Purpose
Bradford방법은 단백질에 발색제를 가하여, 시료의 발색정도와 표준용액의 발색정도와 비교하여 단백질을 정량하는 방법이다. Bradford용액에는 coomassie brilliant blue G-250이 들어 있는데, 이는 dye역활을 하며, 단백질과 결합한다. 대체로 염기성과 방향성 아미노산과 결합하는데 이때 dye의 최대흡광도는 465nm에서 595nm로 이동한다. 따라서 붉은색에서 푸른색을 띄게 되는데, 이는 단백질의 농도가 높을 수록 더 잘 일어난다. 즉 이같은 색 변화로 단백질의 농도를 알아 보기 위한 실험이다(네이버 블로그, 2011).
3. Material & Reagent
3.1 도구/ 기구
• Micro tubes
• 피펫
• 원심분리기
• 얼음
• 분광광도계
• 클린벤치
• 70% 알코올
• 실험용 일회용 장갑
3.2 시약
• Cell lysis buffer (Triton, phosphatase and Protease)
• Protease inhibitor
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