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단백질 정제법. 안용근. 양서각. 1994. 63~70쪽
(2) 실험생화학. 한국생화학회. 탐구당. 1986. 230~231쪽, 255~257쪽
(3) Chemistry Principles & Reaction. Masterton & Hurley. Saunders College Pub. 333~337쪽
(4)http://100.empas.com/entry.html/?i=42522&
(5)http://moolynaru.knu.ac.kr/everyday_scien
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단백질의 양을 정량하기 위해서는 단백질의 본질, 단백질 시료에 있는 다른 성분들의 본질, 정량분석의 신속도 및 정밀도 등에 따라서 적당한 방법을 선택하여야 한다.
단백질을 정량하는 일반적인 방법
(Biuret, Lowry, Bradford Assay) 1) 단
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Bradford
5.1 Bradford
5.2 UV spectrophotometry
6. SDS PAGE
6.1 PAGE gel 조성 및 준비과정
6.2 PAGE 만들기
6.3 Loading
6.5 Staining , Destaining , Dry
Ⅲ 결 과
1. Cell culture
2. Bradford
3. UV assay
4. SDS PAGE
Ⅳ 토 의
Ⅴ
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, 응고반응으로 나눌 수 있다.
‣ 단백질의 정량법에는 UV absorption assay, Bicinchoninic acid assay(BCA), Bradford or Coomassie brilliant blue assay, Lowry assay 등이 있다. 이 중 Bicinchoninic acid assay(BCA법)을 조사했다.
‣ 탄수화물 정성 분석
4. Reference
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단백질과 반응하고, 10-15분후에는 침전하기 시작한다.
-BSA는 2.5ug-15ug에서 linear curve를 보인다
※ 참고문헌
김동열, 식품화학, 문이당, 1988년, pp691-693
Ceirwyn S. James, 알기쉬운 식품분석화학, 광문각, 2001년, 294p
http://blog.korea.ac.kr/servlet/DownLoad/%EB%8B
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크로마토그래피 (Chromatography)
② Ion-exchange chromatography
③ 단백질 정량법 (Bradford assay)
5. Materials & Apparatus
※ Coomassie Blue G dye
※ BSA(bovine serum albumin)
6. Methods
※ 주의사항
7. Results
8. Discussion
9. Reference
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단백질의 amino acid의 조성과는 관계없이 일정하나 단백질의 양이 1~6mg/ml 정도가 있어야 하므로 sensitivity가 낮다는 단점이 있다.
Reference
-학부생화학실험(2) 후반부 교재
-학부생화학실험(1) 전반부 교재
-http://en.wikipedia.org/wiki/Protein_purification
-Bo
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정량시간이 짧아 빠르고 간단하고 발색이 1hr정도까지 유지된다. 다른 분석법에 비해 2배가량 감도(1-20㎍)가 높으며 방해물질이 거의 없어 널리 이용된다. 하지만 단백질마다 조금씩 dye가 결합되는 정도가 다르고 석영 큐벳과 반응하기 때문에
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것 빼고 딱히 어려운 과정이 없어서 실험에 오류가 없었던 것 같다.
5. 참고문헌
생물학 및 실험1 실험서
Wikipedia, Bradford Protein Assay,
http://en.wikipedia.org/wiki/Bradford_protein_assay 1.실험원리
2.실험재료 및 방법
3.실험결과
4.고찰
5.reference
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다. 이 방법은 시료 내 항원의 양이 적거나 다른 간섭물질의 양이 분석하려는 항원의 양보다 훨씬 많을 때 유용하게 활용된다.
: 효소면역측정법 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)는 시료내의 특정단백질의 정량법으로 널리 활용되고 있습니다.
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