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실험 방법
4. Western hybridization
4.1.1. SDS Polyacrylamide Gel electrophoresis
4.1.2. 이론적 배경
4.1.3. 실험방법
4.2.1. Western blotting
4.2.2. 이론적 배경
4.2.3 실험방법
5 ELASA
5.1. 이론적 배경
5.2. 실험방법
III. Results And Discussion
1. Gfp gene 확인
2. Southern
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DNA들이 heterogeneous하게 섞여 있고, prep과정에서 약간의 DNA가 깨졌기 때문이다. 게다가 실험을 할 때 Genomic DNA가 너무 많이 뽑혀버렸기 때문에 아무것도 처리 안한 sample에서 band가 굉장히 두껍게 관찰되었다. 그리고 DNase를 2㎕처리한 샘플에서는
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아가 버리면 염색이 잘 되지 않고 gel이 부풀 수도 있다. 그리고 단백질 고정이 잘되면 destaning시간을 덜어준다.
9. 고찰
이번 실험은 DNA전기영동과는 다른 단백질전기영동 방법이었다. DNA때는 눕힌 상태로 진행 1. SDS-PAGE에서 단백질이 분리
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DNA의 위치를 파악하게 해주는 염색약이다. 파란색을 띠기 때문에 전기영동을 하는 동안 눈으로 확연하게 진행 상태를 확인할 수 있다.
⑩ UV transilluminator
⑪ TAE buffer (1X)
Fig 19. UV transilluminator
- TLC 또는 electrophoresis 실험에 있어서 cell의 검출
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실험을 진행하였으나, DNA의 양의 부족으로 전기영동에서 흐릿한 띠가 나타나게 되었다. 실험재료 준비에서 충분한 양의 DNA를 확보하며, 실험과정 중에서 실수로 DNA가 담긴 용액을 손실하지 않도록 주의 한다.
일부 DNA의 손실에 의한 분자량
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실험목적
제 2 장 실험방법
제 1 절 Culture condition
제 2 절 Agarose gel electrophoresis
제 3 절 Southern blotting
제 4 절 Southern hybridization
제 5 절 SDS-PAGE
제 6 절 Western blotting
제 3 장 Materials and Methods
제 1 절 Culture condition
제 2 절 Agarose gel elect
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electrophoresis capillary scanning (PECS)
DNA 염기서열 결정의 단위시간당 시료 처리량 즉 throughput을 향상시키기 위하여 postelectrophoresis capillary scanning (PECS) 방법을 개발하였다. 이 방법은 모세관 전기영동에 의한 DNA 염기서열결정 반응물의 분리와 분리
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영동하면 같은 염기서열을 가진 같은 크기의 DNA라 하더라도 이동하는 거리는 각각 다르게 나타난다. size marker로 사용하는 짧은 DNA는 선형의 DNA이다. 따라서 전기영동으로 size를 비교할 수 있는 DNA는 선형 DNA이다.
6. Reference
분자생물학 실험서
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전기영동한 후 gel을 ethidium bromide가 0.5 g/ml 포함된 용액에 30~45분간 더 염색하였다가 관찰하는 것이 더 선명한 DNA 띠를 관찰할 수 있다는 이유로 후자를 선호하는 실험자들도 있다. 이 때 탈색 과정은 보통 필요치 않으나, 10 ng 이하의 적은 양의
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전기영동한 시료 2ul와 염색시약(loading star) 1ul을 같이 섞은 후 gel에 닿지 않게 조심히 넣어준다.
-이쑤시개로 균을 채취 하는 과정에서 오염이 발생할수 있기에 주변을 소독 해준뒤 clean bench에서 작업을 시행한다.
실험결과
초기 재래식 메주에
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