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역상크로마토그래피를 이용하여 색소를 분리했을 때, 1차 분리 액에 색소 Y만 분리되어 나온 것이 아니라 색소 B가 섞여있었다. 색소를 정확하고 정밀하게 분리하기 위해서는 plunger를 일정한 압력으로 밀어줘야 할 것 같다. 갑자기 높은 압력
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서 위치한 순서대로 노랑색 ＞ 빨강색 ＞ 파랑색 임을 알 수 있다. 30% 메탄올 수용액 또한 극성용매이므로 같은 순서로 위치하나 극성이 보다 약해(디스커션 참조) 경계가 명확하지 않게 된다.
※ 정상크로마토그래피와 역상크로마토그래피
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크로마토그래피는 정전기적 인력을 이용한다. 둘째로 역상크로마토그래피와 소수성 크로마토그래피는 소수성 상호작용에 의한다. 분자체는 겔여과, 크기배제크로마토그래피라고도 한다. 겔상태의 충진제입자의 내부로 삼투하기 쉬운 정도
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해지는 것이라고 해석 할 수 있다. His 의 경우 암모니아를 첨가한 경우 약 10배 정도 더 높이 상승했기 때문에 극성이 더 약해 졌다고 할 수 있다.
실험 2. 역상 크로마토그래피에 의한 식용 색소의 분리
실험 2 는 고정상으로 극성이 낮은 탄화
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상 크로마토그래피에서 물로 정지상 실험을 하여 적색이 먼저 나오고 실험1,2의 결과가 상이하였다. 역상 크로마토그래피에서 보다 극성 작은 메탄 사용했더라면 적색이 극성이 작게 나왔을 것이다. 물은 극성이 상당히 커서 이를 발 분리하
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게 되고 극성이 높은 성분은 물에 섞여서
빠져나가는 성질을 이용한다. 이동상으로 물을 택했을 때 노란색 색소가 빠져 나왔고,
파란색 색소는 나오지 않았다. 노란색 색소가 다 빠져나온 후 이동상을 30%의
에탄올로 바꾸자 파란색 색소도 빠
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에서는 필수아미노산이다. 분해하여 히스타민을 생성한다.
③ 알라닌 (alanine -Ala)
모든 단백질에서 볼 수 있다. 피루브산에서 생합성되며 트립토판의 대사과정에서도 생긴다
실험 B
색소와 극성과의 관계를 살펴보았다. 1876년 독일 화학자 O.N.
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/L
따라서 용액 M에 들어있는 요액 Y와 용액 B의 비율은 약 6:1이다.
Beer-Lambert 법칙을 이용해서 구한 비율인 5:1과는 약간의 차이가 있지만
추세선은 근사해서 구한 그래프이기 때문에 Beer-Lambert의 법칙을 이용해서
구한 것이 더 정확하다고 본
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잘 모르기 때문에(극성만으로 판단하기는 무리가 있다) 다른 물질을 제안하기 힘들다. 하지만 고정상이라면 이야기가 다르다. 고정상은 역상 크로마토그래피의 특징상 비극성이고, 극성인 두 색소와는 큰 인력을 가지지 못한다.(사실 인력이
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크로마토그래피 - 액체 크로마토그래피의 원리와 응용 : 이대운, 민음사, 1991
(3) 기기분석화학 : 이문득, 자유아카데미, 1991
(4) 기기분석 : 김하석·이후성·채명준 공저, 동화기술, 1989
(5) Contemporary Practices of Chromatography : C. F. Poole·S. A. Schuette, El
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