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의한 유용산물생산에 있어서 재조합DNA기술의 의의
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DNA추출과 환인
단백질의 추출과 확인
제한 효소를 이용한 DNA의 절단
전기영동의 원리와 실제
항생제 내성 대장균의 검출
플라스미드의 추출과 확인
대장균의 형질 전환
<중학교 교육 과정>
『재량활동』
환 경
1. 성격
‘환경’과목은
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DNA(ex: 외래 유전자를 삽입한 플라스미드)를 대량 생산을 목적으로 한다. mini-prep 에서는 E.coli에 넣은 gen을 빼내는 것을 목적으로 한다.
3. 실험 재료 : E.coli, centrifugation, 여러종류의 buffer(아래 실험방법 및 순서 참조), etube, filter... etc..
4. 실
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. 그러나 거품, 단백질의 변성, 침전들이 일어나 일반적으로 사용되지 못하는 단점이 있다. 1. DNA구조
2. 전기영동이 되는 이유?
3. 미생물배지
4. 항생제의 개념과 플라스미드를 넣는 이유?
5.solution 1,2,3 기능
6. Cell-lysis 방법 3가지
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DNA를 측정해 본 결과에 차이가 있었다. 에탄올 세척할 때 원심분리한 것과 그렇지 않은 것의 차이가 있었던 것으로 보인다. 원심분리 안한 채 세척한 농도가 1.4, 원심분리한 쪽의 농도가 2.0으로 후자가 더 순도가 높았다. 이것은 에탄올로 세
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분리되어 알아보기 쉬었고, 4조의 경우는 실수를 하여 다른 조에 비해 시간이 짧다보니 DNA 가 덜 분해되었던거 같다. 우리조의 경우 제대로 된 결과값을 알아보지 못해서 아쉽다. DNA와 RNA를 염색하는데 주로 사용되는 EtBr (Ethidium Bromide)은 돌연
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DNA를 변형시키는 효소들은 magnesium과 같은 2가 이온을 필요로 하므로 EDTA 를 조금 넣어주면 이런 효소들로부터 DNA를 보호할 수 있습니다.
DNA가 눈에 보이기도 하고 양이 적으면 잘 보이지 않기도 합니다. 그러나 상당히 순수한 plasmid DNA가 분리
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DNA 침전물을 씻은 다음 20,000×g에서 2~3분간 원심분리한다.
⑼ 상층액을 모두 따라 버린다음, 깨끗한 필터 위에 튜브를 뒤집어 10~20분 정도 공기 중에 놓아두어 모든 에탄올이 증발 하도록 한다.
⑽DNA 침전물을 200μl의 증류수나 TE(10mM Tris-1mM EDTA,
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기 연동 하는 사진. 전기 연동 결과.(오른쪽부분)
Ⅲ. 결과 및 토의.
1.실험에 대한 의견: DNA를 분리하는 것이 이렇게 복잡한 과정을 거치는 줄 몰랐는데 생각보다 손이 많이 가고 들어가고 시약도 많이 들어가서 힘들었다. 그리고 유방암세포를
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DNA)
- 농도는 1ug/100ul까지 가능한데 대개 0.4ug/100ul의 농도로 사용하면 증폭이 잘
된다. 처음에는 충분한 양으로 시작하여 원하는 결과가 나오면 DNA양을 차차
줄여 반응을 최적화 한다.
- plasmid가 genomic DNA보다 훨씬 PCR이 잘되며 일반적으로 50-500b
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