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DNA를 변형시키는 효소들은 magnesium과 같은 2가 이온을 필요로 하므로 EDTA 를 조금 넣어주면 이런 효소들로부터 DNA를 보호할 수 있습니다.
DNA가 눈에 보이기도 하고 양이 적으면 잘 보이지 않기도 합니다. 그러나 상당히 순수한 plasmid DNA가 분리
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Plasmid Preparation"
2. 위키백과 “에틸렌다이아민테트라아세트산“
3. QIAGEN "QIAprep Spin Miniprep Kit"
4. 네이버 지식사전 “흡광도, hyperchromic effect" Introduction
-solution 1,2,3
-EDTA
-miniprep.
-흡광도(absorbance , optical density)
-감색효과 (hyperchromic effect)
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DNA 분리와 젤 전기영동, 그리고 DNA 정량
Purpose & Introduce
E.coli로부터 plasmid DNA를 분리하는 방법을 익히고, 전기영동의 원리에 대해 알아보고 실험해보며, DNA정량 하는 법을 배운다.
Plasmid DNA 분리는 주로 miniprep라 부르는 방법으로 plasmid DNA를
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, 이들을 전기영동하면 같은 염기서열의 같은 크기
DNA라도 이동하는 거리가 제각기 다릅니다.
Size marker로 쓰는 짧은 DNA는 linear form입니다.
이렇게 전기영동으로 size를 비교할 수 있는 DNA는
linear form DNA 뿐입니다. Alkali lysis method
miniprep
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조심스럽게 에탄올을 버린다.
27. ice-cold 70% 에탄올 1ml를 첨가하고 섞는다.
4도에 15분동안 15000rpm으로 원심분리한다.
28. 작은 알들이 생성이 되지 않도록 조심스럽게 에탄올을 버린다.
29. 마지막으로 에탄올을 빼서 말리고 몇 분동안 클린벤치
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