|
기기에 넣어 흡광도를
측정하여 데이터 값을 얻어낸다.
(중간 이상으로 빛이 통과하기 때문에 굳이 많이 넣을 필요는 없다.)
⑥ 얻어낸 데이터 값(1mL,2mL,3mL,4mL,5mL, 콜라1mL 측정값)을 이용하여 검량선을 구하 고 미지시료의 측정값을 대입하여
|
|
|
흡광도의 변화가 눈에 띄게 나타났다.
그리고 7번째 측정을 하였을때 이 측정범위에서 더 이상의 흡광도 변화가 없었는데 이는 개시반응이 다 끝났음을 의미한다.
기기에서 나온 자료를 토대로 시간에 대한 -ln(A/A0)의 그래프를 도시할대 자료
|
|
|
정의
Spectrophotometer(분광광도기)란?
- 특정 파장의 빛이 화학물질에 의해 흡수되는 정도를 측정하는 기기
어떤 시료 분자가 어느 파장의 빛을 흡수하며, 그 흡광도는 얼마나 되는지 측정하는 기기 장치.
UV(ultra violet) 파장 200-400nm 자외선
VIS(v
|
|
|
흡광도 값을 X, Y측으로 하여 추세선을 그리고 이것을 토대로 crude 값의 농도를 구해볼 수 있다. 하지만 실험결과 많은 오차가 생성되었는데, 이것은 실험시 pipeting의 미숙이라든가 불순물이 들어갔을지 모르며 흡광도 실험시 여러 불순물이 잔
|
|
|
기기는 종류도 많지만 사용하는 분야와 깊이에 따라 다양한 변화가 요구된다. 즉, 사용할 때는 사용 목적을 정확히 알고, 기기 선정이나 방법을 선택 해야한다. 일반적으로 열분석은 다른 분석 기기와 구분을 해주어야 하는데 소위 말하는 fing
|
|
|
흡광도를 읽는다.
⑥ 흡수띠 근처에서 더욱 근접한 간격으로 읽는다.
⑦ 처음 용액을 희석하여 다시 스펙트럼을 얻는다.
⑧ 이러한 과정을 피크에서 약 1로 표시된 흡광도(투광도∼0.1)가 얻어질 때까지 반 복한다.
⑨ 가장 좋은 결과를 준
|
|
|
흡광도를 측정한다.
⑧ Standard와 sample시료 모두 될 수 있으면 duplication 이상 반복한다.
⑨ 엑셀을 이용해 측정된 BSA의 흡광도 평균값으로 표준곡선을 그리고 1차 방정식을 구한다.
⑩ 그 후 sample의 흡광도 평균값을 대입하여 x값(단백질
|
|
|
흡광도를 측정한다.
⑧ Standard와 sample시료 모두 될 수 있으면 duplication 이상 반복한다.
⑨ 엑셀을 이용해 측정된 BSA의 흡광도 평균값으로 표준곡선을 그리고 1차 방정식을 구한다.
⑩ 그 후 sample의 흡광도 평균값을 대입하여 x값(단백질
|
|
|
흡광도를 분광 광도계로 측정하는 방법이다. 단백질에는 주로 tyrosine 및 tryptophan의 측쇄로부터 유래된 280nm 부근의 흡수가 있으나 buffer에는 이 부분의 흡수를 가지는 것이 적기 때문에 이것을 측정한다. 측정법위는 0.1~1mg/ml 정도로서 간단하게
|
|
|
분석법으로 comassie brilliant blue G-250이라고 하는 색소가 염기성과 방향족 아미노산 촉새와 결합하여 그 결과 흡수피크가 465nm에서 595nm로 이동하는 것을 이용한 방법이다. 산성조건에서 hydrophodic과 ionic interaction이 dye의 anonic형태를 안정화시킴으
|
|
메뉴펼치기
