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의 0.05 M KMnO4를 넣고 섞는다.
- 1 volume의 0.25 M HCl를 넣어 섞고 실온에서 6시간 정도 둔다.
- 1 volume의 0.25 M NaOH를 넣고 섞는다.
★ Supercoiled DNA와 linear DNA
대부분의 plasmid는 세포내에서 supercoiled circular DNA로 존재하며 이러한 supercoiling은 plasmid replica
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효소들의 종류
(1) Nuclease
(2) ligase
(3) polymerase
(4) modifying enzyme
(5) topoisomerase
3) 제한효소의 종류와 절단부위
4) 제한효소를 이용한 DNA의 절단시 고려할 사항들
5) 대표적인 DNA절단 제한효소와 절단 인식자리
6) 전기영동(electrophoresis)
(1) 전기영동
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의해 흡수되는 자외선 방사의 양을 결정함으로써 어떤 화합물의 양을 결정하는 방법
Vector
.재조합 DNA 분자를 구축하기 위해 어떤 유전자를 삽입하여 숙주 생명체에서 복제 가능한 DNA 분자
.[1]재조합 DNA실험에 있어 제한효소 등에 의해 절단
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의 대표적인 것이 바로 restriction enzyme 또는 restriction endonuclease이라고 한다. DNA에 존재하는 특정한 염기서열을 인식하고 인식한 서열부위 또는 그 근처에 존재하는 특정부위를 절단한다.
제한효소는 원래 세균이 자신의 세포 내로 침입해 들
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thylase활성이 인식하는 염기배열은 동일하나 DNA를 절단하는 부위는 일정하지 않으므로, 특정 크기의 DNA 단편을 생성하지 않는다.
2. II 형 제한효소
2만~10만의 분자량을 가진 것이 많으며, 활성발현에 Mg2+.만을 필요로 하고, 2본쇄 DNA분자내의
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의 DNA라도 초나선구조는 표면적이 작기 때문에 전기영동에서 빨리 이동하고 선형구조는 초나선에 비해 표면적이 크므로 늦게 이동하기 때문이다. 본 실험에서는 똑같은 플라스미드 DNA에 제한효소를 처리 한것과 하지 않을 것을 사용하였으
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DNA 기술은 1953년 유전자가 DNA라는 사실과 DNA의 구조가 밝혀지면서 예견될 수가 있었다.
이 재조합 DNA 기술은 박테리오파지와 플라스미드에 관한 연구와 DNA에 작용하는 효소들, 특히 제한효소와 DNA리가아제에 관한 연구 등에 의하여 발견된
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경우 효소에 의해 다시 잘려, agarose gel로 전기영동 하였을 때 vector와 insert, 이렇게 2 band로 나오는 것을 이용한 것이다.
DNA
10㎕
10×H buffer
2㎕
NdeⅠ
1㎕
XhoⅠ
1㎕
DDW
6㎕
total
20㎕
다시 PCR로 확인해 보았다.
premix에 다음과 같이 넣고 PCR을 했다.
DNA
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의 품종 지문화 연구 및 순도검정 마커 개발. 연구보고서 3-84
- 이계동(2003) 수박 F1 종자 순도 검정을 위한 DNA Marker 개발. 한경대 산업대학원
- 박효근(1984)동위효소 분석법에 의한 무우 종자의 순도 검정. 서울대학교 1-27
- 이지은, 김성길(2009) DN
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