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1997
“전기영동” http://blog.naver.com/hongmsoo?Redirect=Log&logNo=150016260288, 5월 27일 검색
이갑상, 『미생물학 분자생물학사전』, 대학서림, 1997 1. 실험 목적 및 원리
2. 재료, 시약, 기구
3. 실험 방법
4. 결과
5. 고찰 및 이해
6. 참고문헌
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PCR의 내열성 DNA 중합효소인 Taq 중합효소는 뜨거운 온천에 사는 호열성 세균에서 추출한 중합효소로 DNA가 변성되는 94℃의 고온에서도 중합효소가 변성되지않고 그 활성을 오랫동안 유지할 수 있는 놀라운 특성이 있다.
7. References
- Taketoshi / P
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아닌 것으로 생각된다. 결국은 나의 미숙한 pipet사용이 primer를 넣을 때 문제를 발생시킨 듯하다. 1. PCR의 목적
2. DNA ladder의 패턴을 확인하여 PCR product의 size를 확인
3. DNA polymerase로 Taq polymerase를 사용하는 이유는?
4. dNTP의 역할
5. 고찰
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이동하는데, 작은 것은 빨리 가고 큰 것은 천천히 간다. 이런 원리로 크기별로 핵산을 분리한다. 1. PCR의 원리와 이를 이용한 응용분야에 대해 설명하세요.
2. PCR 반응에 필요한 시약 및 효소의 종류와 각각의 역할에 대해 설명하세요.
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전기영동 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?6
① SDS-polyacrylamide gel electro- phoresis, SDS-PAGE
② isoelectric focusing
4) 5.4 단백질의 1차 구조 결정하기? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 8
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결과가 모두 잘 나타나서 기분이 좋았다. 다른 조는 조원 모두 안나 온 경우도 있었는데 그 이유를 생각해 보았다. 그것은 개인 한 사람의 문제가 아니라 전체적으로 잘못 된 것이라고 생각한다.
Template DNA의 양이 적었을 때, PCR cycle의 횟수가
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PCR의 경우 2종류의 primer와 반응해야만 되기 때문에 이론적으로는 17 mer로 충분하지만 일반적으로 20 mer 전후의 primer를 가장많이 사용한다.
primer 디자인을 한 후에 가상으로 확인하여 PCR이 잘 될지 안 될지 확인하는 사이트
http://compute.yeastgeno
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DNA의 이동 속도에 영향을 주는 요인
1. DNA의 크기
2. DNA의 형태 (속도 : 초나선 환상>열린환상>선형)
3. Agarose의 농도 (0.8%/1%/2%-PCR)
4. 전압의 세기
5. Buffer의 조성(TAE buffer)
*Alkaline Lysis
1. NaOH로 시료를 처리하면 세포가 파괴되고, DNA염기쌍의 수
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전기 영동시 UV를 비춰 DNA의 이동을 바로 확인할 수 있다.
DNA의 이동속도가 15% 늦어진다.
전기영동시 EtBr이 없으면 Sharp한 band를 얻을 수 있다.
DNA의 형태에 따라 EtBr의 결합정도가 달라져서 natural한 pattern을 보기 어렵다.
전기영동 tank 및 gel tr
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와 같이 첫 번째 홈에 loading한 DNA ladder (기준이 되는 샘플)와 우리 6조의 결과를 비교했을 때 약 4.0kbp의 크기를 가지는 plasmid DNA가 얻어진 것을 확인할 수 있었다.
Fig 17. DNA ladder와 전기영동 실험 결과
4. Discussion
이번 실험에서 추출한 plasmid DNA
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