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생화학실험_PCR과 전기영동 그리고 RPLF
목차
Ⅰ. 서론
1. 실험 이론
Ⅱ. 본론
1. 실험 방법
2. 실험 결과
Ⅲ. 결론
1. 고찰
2. 참고 문헌 및 참고 사이트
Ⅰ. 서론
생화학 실험에서 PCR(Polymerase Chain Reaction), 전기영동, 그리고 RF
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4. 실험과정
(1) PCR
(2) Ligation
(3) Transformation & seeding
- ① Ligation 시킨 반응물 5 ㎕를 Top 10 competent cell에 첨가한다.
② 얼음에 5분간 방치한다.
③ 42℃에서 30초간 heat-shock 시키고 즉시 얼음에 1~2분간 둔다.
④ SOC 배지 200 ㎕를 가하고 37도 incu
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PCR은 매우 민감하다.
3. 실험기구 & 시약
① TE(tris EDTA) buffer
<↑EDTA>
DNA의 경우 pH8.0 / RNA의 경우 pH7.5 / DNA+RNA 경우 pH8.0
pH 8.0 : 100mM tris-cl (pH8.0) + 10mM EDTA(pH8.0)
Tris-cl(pH8.0) : trizabase 를 증류수에 넣고 pH8.0까지 HCl로 조절한다.
② DNA sample
③ Spectro
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높다면 template와 잘 binding하지 않으므로 온도 설정에 주의가 필요하다.
7. 참고문헌
1) 생화학실험(2) 실험교본, 교육과학기술부의생명특성화사업단.
2) Jeremy M. Berg, John L. Tymoczko, Lubert Stryer. 2007, Biochemistry, sixth ed.
3) http://en.wikipedia.org/wiki/
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생화학실험(2) 전반부 실험교본
-http://blog.daum.net/skadkfl3/2963199
-http://en.wikipedia.org/wiki/Site-directed_mutagenesis
-www.genehunters.co.kr
-http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/site_directed_muta. php
-http://blog.naver.com/shanti78/40017326354 1. 실험제목
2. 실험일자
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