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Plasmid DNA와 Insert DNA를 자를 때 정제를 하지 않으면 잘 잘리지 않기 때문에 중요한 단계이다. 따라서 DNA의 정제를 통해 순도를 높여 주어야 한다.
정량을 하는 이유는 실험할 때 정확한 양의 DNA가 필요하기 때문에 한다. 그리고 계속 실험에 쓰
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Electrophoresis
• 1970년 Laemmli이 개발
• 전기영동을 이용한 기술
• 생화학과 유전학 및 분자 생물학에서 단백질 분리 기술로 이용
SDS-PAGE의 실험원리
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• 아미노산
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모양으로 자른다. 이런 모양으로 총 15개를 준비한다.
..
(후략)
세포분열관찰
삼투압의 측정
발효와 호흡
식물색소분리
효소의 작용
제한효소와 DNA전기영동
형질전환
protein-overexpression
bioinformatics
코아세르베이트 관찰
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방법들도 존재한다. 어떤 방법들이 있는지 설명하라.
2R-4. Chromosomal DNA와 같이 분자량이 큰 DNA들은 일반적인 Agarose gel에서 분리하기가 힘들다. 이 때 orthogonal field alternation gel electrophoresis (OFAGE)가 사용되는 데 이 전기영동법을 설명하라.
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plasmid DNA에 비해 대단히 크고 단백질과 RNA 등과 함께 복합체를 이루고 있어 그 추출에 상당한 주의가 필요하다.
≪ … 중 략 … ≫
Discussion
이번 실험은 생물의 유전 정보를 담고 있는 DNA를 진핵생물로부터 추출하여 PCR을 통하
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arose gel을 이용한 방법으로 실험하였다.
Agarose gel은 해상도는 낮지만, DNA 단편을 200 bp에서부터 50 kb까지 분리할 수 있으며 사용이 간편하고, 다루기가 쉽기 때문에 현재 가장 많이 사용되고 있는 전기영동이다. Agarose는 해초로부터 추출되는 물
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분리 한다. 마지막으로 분리된 단백질을 염색하여 Prestained Protein marker와 비교하여 단백질의 분자량을 추정해본다.
4. Introduction
① 전기영동법
전기영동(electrophoresis)이란 하전된 입자가 전기장에서 양극 또는 음극 쪽으로 이동하는 현상
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분리 정제 분류
단백질의 화학반응
- 크로마토그래피 ① 이온 교환 크래마토그래피
- 크로마토그래피 ② 겔 여과 크래마토그래피
- 크로마토그래피 ③ 친화 크래마토그래피
- 원심 분리
- 전기영동 ① SDS-PAGE
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효과는 단백질이 고유pH에서 순 영전하로 된다. Ⅰ. Introduction.
2. 전하에 미치는 pH의 영향
3. Agarose gel electrophoresis
[Agarose gel 전기영동시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들]
4. 실험설계
Ⅱ. Materials
Ⅲ. Method.
Ⅳ. Result.
Ⅴ. Discussion.
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기존동물의 이용효율을 획기적으로 극대화 시킬 수 있는 기술의 발달로 많은 산업분야에 엄청난 수익성을 가져 다 줄 것이 기대된다 (1) DNA의 분리와 정제
(2) PCR
(3)전기영동
(4) DNA library제조
(6)western blotting
(7) 형질전환 동물
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