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된 것이다. 그리고 vector의 경우, 전기영동 사진은 uncut사진과 cut사진의 비교가 필수적이다. 이는 uncut plasmid DNA가 Nicked , Linear, Covalently Bonded, Supercoiled, Circular single stranded 등 다양한 형태로 존재 할 수 있다. 하지만 uncut plasmid에서 Linear의 형태로
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PLASMID 뿐만 아니라, 염색체 내에 역시 존재하기 때문으로, ligated DNA가 Vector의 염색체로도 삽입이 되어, α-peptide가 생성되지 않아 결국 β-galactosidase 를 만드는 α-complementation이 이루어지지 않았기 때문이다.
Microtube에는 Com.cell이 200μL가 있었지
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편을 플라스미드에 연결할 때에는 DNA를 절단한 방법에 따라 다르다. cohesive-end방법에 의해서 DNA가 절단된 경우와, blunt-end방법에 의한 예는 다음과 같다. Eco R I에 의하여 절단된 DNA의 말단은 AATT의 염기순으로 되어 있고 Hind Ⅲ은 AGCT, Bam H I는 GA
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plasmid(vector) 10㎕에 넣고
tapping하고 ice에서 40min 대기.
⇒ competent cell : plasmid = 10 : 1. 이보다 클 경우 효율 낮아짐.
plasmid가 competent cell membrane에 붙어 있음.
ⓒ 42℃에서 1min 30sec 동안 heat shock.
ⓓ 1min간 ice에서 안정화시킴.
ⓔ clean bench에서 LB배지 8
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DNA 기술은 1953년 유전자가 DNA라는 사실과 DNA의 구조가 밝혀지면서 예견될 수가 있었다. 이 재조합 DNA 기술은 박테리오파지와 플라스미드에 관한 연구와 DNA에 작용하는 효소들, 특히 제한효소와 DNA리가아제에 관한 연구 등에 의하여 발견된 업
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DNA를 변성시켜준다. SDS는 일종의 계면활성제로 세포막을 깨는 일을 한다.
(3) Neutralization buffer
Neutralization buffer에는 potassium acetate, glacial acetic acid가 들어가는데 potassium acetate는 pH를 낮추며 potassium 이온과 SDS가 결합 하여 염색체 DNA, 단백질 등과
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DNA추출 실험에서 이 과정에서는 vortex를 해야 하는데 이때 세포가 완전히 깨지게 되면 chromosomal DNA가 잘게 깨지게 되어 plasmid DNA와 구분할 수 없게 된다. 따라서 이렇게 세포를 유지시켜가면서 세포벽만 깨는 것이다. 이번 실험에서 EDTA를 넣는
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er:분석하고자 하는 DNA를 비교할 수 있도록 전기영동시 그 크기를 알 수 있는 DNA를 Marker 이라 한다.
② loading dye: loading dye는 크게 두 가지 기능을 지닌다. 첫째는 사용하는 물질이 잘 가라앉도록 하고, 둘째는 이 물질이 대략 어느 정도 전기영
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플라스미드를 이용한 유전자의 분리 (cloning)
4) 클론된 유전자를 이용한 형질전환 동식물의 개발 (transgenic animao and plants)
4) 유전자조작 생명체 (Genetically modified organism)과 유전자조작 식품 (GMF)
2. 중합효소연쇄반응 (polymerase chain reaction, PC
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DNA is deleted between the particular V gene-segement and J gene-segment chosen for recombination. Many different combinations are possible. 1. Interaction of DNA and Proteins that Recognize a Specific Base
2. TRANSLATION
3. Mutagenesis, Mutations, and Mutants
4. Plasmids
5. REGUL
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