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k)하게 진행된다. Plasmid에서 코드되는 RNAII molecule이 primer로 작용, ori 에 binding하여 DNA polymerase I과 함께 replication이 일어난다. 이때 RNAII에 complementary한 RNAI이라는 RNA molecule이 RNAII와 hydrogen bond로 결합하면 RNAII가 oriV에 binding하지 못하여 replication
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Plasmid DNA 분리와 전기영동
<그림4. 전기영동 결과>
전기영동 결과 4kb DNA가 검출되었다.
Ⅳ. 논의
플라스미드 DNA는 박테리아와 일부 균에 존재하는 염색체 이외의 DNA 로 ‘작고 스스로 복제하는 두 가닥의 환형의 DNA’라 정의할 수 있다. 플
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플라스미드)를 대량 생산을 목적으로 한다. mini-prep 에서는 E.coli에 넣은 gen을 빼내는 것을 목적으로 한다.
3. 실험 재료 : E.coli, centrifugation, 여러종류의 buffer(아래 실험방법 및 순서 참조), etube, filter... etc..
4. 실험 방법 및 순서 :
ⅰ 배양
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Date
2010년 10월 7일 ~ 14일
Subject
Plasmid DNA 분리와 젤 전기영동, 그리고 DNA 정량
Purpose & Introduce
E.coli로부터 plasmid DNA를 분리하는 방법을 익히고, 전기영동의 원리에 대해 알아보고 실험해보며, DNA정량 하는 법을 배운다.
Plasmid DN
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Plasmid DNA 분리 (이온 교환 크로마토 그래피)
형질전환 된 E.Coli cell로부터 plasmid DNA를 재분리 하고자 하는 실험으로서, plasmid preparation method에는 alkali lysis법, boiling법, 효소 분해법 등이 있다.
형질 전환 균주가 갖고 있는 플라스미드에 존재
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분리향상」, 분석과학, Vol.19, No.6, 김희준외 6명 공저, 한국분석과학회, 2006, p529-532.
-「최신 생화학」, 김을상, 신광문화사, p135-138.
-「다양한 정제방법에 의한 전기영동용 한처유래 아가로즈의 제조 및 DNA 분리특성」, 한국식 품과학회지 Vol.31
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분리 또는 합성하여 유전자를 재조합하거나 재조합된 새로운 유전자를 세균 등에 도입하여 특정한 생물활성물질을 다량으로 저렴하게 생산하게 할 수 있어서 이미 선진국들은 이의 실용화를 위하여 크게 투자하고 있다. 유전공학의 발전은
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