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Plasmid DNA 분리
centrifuge, e.p tube, column(max 750ul), conical tube, pipette, vortex, collecting tube
2) DNA 농도 측정
UV-Vis Spectrophotometer, Cuvette, pipette, e.p tube, TE 완충용액
3) DNA electrophoresis
Mini gel running kit, UV illuminator, vortex, TAE(tris-acetate) buffer
Microwave o
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plasmid DNA는 20℃에서 보관한다.
3) 전기영동
①Well의 왼편에 size maker를 5ul 넣고 다음 well부터 차례로 loadingdye와 섞은 DNA를 넣는다. (20ul loading)
②전기영동장치의 플러그를 전력공급장치에 연결한 후, 전기를 걸어 20~30분간 전기영동을 한다.
③
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1. Purpose
2. Introduction
3. Material & Supplies
4. Procedure
◎ Plasmid 분리 실험
◎ Agarose gel을 이용한 plasmid 전기영동
5. Result
◎ Plasmid 분리 실험
◎ Agarose gel을 이용한 plasmid 전기영동
6. Discussion(자필)
7. Refrence
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1. 운반체로서의 plasmid란 무엇인가?
2. 분자유전학적 관점에서의 plasmid의 용도와 그 기능을 간략히 서술하시오.
3. Plasmid 구조(형태)에 대해 서술하시오. (그림포함)
4. 자신의 DNA gel 사진을 첨부하시오.
5. Gel 사진을 보고 Uncut DNA, Vector, I
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plasmid isolation
3.전기영동(Electrophoresis)에 의한 DNA분리
4. 제한효소 (restriction enzyme)
5. E.coli : transformaion
6. 접합(Conjugation)
7. Transduction 형질도입-> bacteriophage
8. PCR(Polymerase Chain Reaction)
9. RNA isolation / DEPC solution / 주의점
10. Protein expression / SDS-Pa
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실험 목적
Plasmid DNA의 구조적 특징을 이해하고 이를 이용하여 Plasmid DNA를 Purification한다.
DNA Purification 한 것을 전기 영동을 통해서 DNA를 크기 별로 분리하여 확인한다.
Plasmid DNA
Bacteria내에서 Chromosomal DNA와는 별도로 발견되는 작은 DNA, Ch
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전기영동 ( electrophoresis )
■ DNA 정량
(1) DNA의 농도측정 원리
(2) 분광광도계( Spectrophotometer)
4. 실험재료
5. 실험방법
■ 제한효소 처리 및 Plasmid DNA확인
■ UV-visible spectrophotometer를 이용한 Plasmid DNA의 순도분석
6. 결과
7. 토의
8. 결
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electrophoresis
7> gel이 굳으면 comb을 제거하고 electrophoresis tank에 gel판을 옮긴다.
8> 전기영동 tank에 running buffer(1x TAE)를 gel을 1mm정도 두께로 덮도록 채운다.
전기영동 tank와 gel은 동일한 전기영동 완충액을 사용해야 한다. 이온강도 또는 pH에
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, 공유결합으로 연결되어 잘리지 않은
Supercoiled Plasmid는 다시 이중나선 구조로 결합(renature)되어
상등액에 남고, 세균 DNA는 잘려진 Linear DNA가 되어 단백질과 같이
Potassium과 SDS간에 형성되는 Complex 속에 갇혀 침전된다(원심분리시)
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전기영동(Electrophoresis), 감동그리고환상, 2011.09.18 22:12
http://blog.daum.net/soar7007/7965306
작전명 공부하는 대학생들, 의데공대생, Plasmid DNA Mini Prep, 2013.10.31
캠벨 생명과학 포커스 2판, Lisa A. Urry 외 4명, ㈜바이오사이언스출판, 2019
핵심 일반생물학 실
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