단백질 정량방법 (캘달법 위주)

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본문내용

적정하여, 이 적정치로 부터 질소량을 산출한다.
ⓑ H2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2H2O
▶ 장치, 재료 및 시약
ο 진한 황산(비중 1.84, H2SO4)
ο 30% NaOH : NaOH 30g을 칭량하고 소량의 물을 넣고 진탕하여 녹인 후 물 100ml로 mess up
ο 분해촉진제(K2SO4 : CuSO4 = 9 : 1 의 혼합분말) : 막자사발로 분쇄하여 조제
ο N/10 H2SO4
ο N/10 NaOH
ο 혼합지시약 (0.1% methyl red : 0.1% methylene blue = 2 : 1)
ο 200ml kjeldahl flask
ο 가열기구 (분해 장치)와 증류장치
ο 시료 : 밀가루(중력분 1g)
ο 뷰렛 (25 or 50ml)
ο 피펫, 필라
ο 100ml mess flask
ο 비등석 or 분말아연(boiling chips)
▶ 실험방법
분해
ο 시료 1∼5g(질소 10mg에 상당 하는 양)을 정확히 칭량(고체일 경우 파라핀지 사용)
★ 밀가루(중력분)의 경우
8.6g(단백질) / 100g(밀가루) → 0.086g(단) / 1g(밀)
질소량 = 단백질량 / 6.25 = 0.086g / 6.25 = 0.01376g(질소) / 1g(밀)
= 13.76mg(질소)/1g(밀)
ο 200ml keldahl flask에 넣음(이때 시료가 flask에 부착되지 않도록 주의)
ο 여기에 분해촉진제 0.5g, 진한 황산 10ml를 가하고
ο draft실(hood내) 또는 분해대 중에서 천천히 가열하여 비등 후 방냉
가. 분해병을 분해대에 올려

키워드

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