균 배양

소개글

균 배양에 대한 보고서 자료입니다.

목차

균 배양



①실험제목 : 균 배양
②실험일자 : 2013.03.25 월
➂실험조 : 2조
➃실험목적
➄실험원리 :
1.미생물이란?
2.배지의 종류
3.Luria Bertani (LB) 고체배지의 재료별 역할
4.도말이란?
➅실험방법
➆실험도구 :
➇실험결과
☆과제!
ampicillin stock을 넣어주는 이유
2. 균 배양하기

본문내용

우리가 원하는 것은 우리가 원하는 재조합 DNA가 들어간 cell만을 colony를 띄우고 싶지만 transformation은 매우 효율이 낮기 때문에 전체적 과정을 거친 후에 얻는 cell은 self-ligated vector를 포함한 cell, 원하지 않은 DNA가 잘못 끼어들어간 vector를 포함한 cell, 아무런 vector가 들어가지 않은 cell 등 여러가지 변수가 존재하게 된다. 이중 가장 많은 경우가 아무런vector가 들어가지 않은 cell이다. 이를 거르기 위해서 사용하는 것이 ampicillin 같은 항생제이다. vector에 항생제 내성 gene이 있으니 vector가 없는 cell은 항생제를 견디지 못하고 죽게 된다.
이렇게 selection한 vector가 들어간 cell은 2번째 selection marker를 이용해서 분리합니다.
⇒Ampicillin stock은 대게 100mg/ml가 되도록 물에 녹여 filtration 하여 멸균된 tube에 분주해서 보관하고, LB에 넣어줄때는 최종농도 100㎛/ml가 되도록 넣어주면 된다.
이 때 넣어주는 Ampicillin stock의 부피를 알기위해
MV = M\'V\'를 이용하여
즉 500㎛를 넣어주면 된다.
2. 균 배양하기
1)plate에 균이름, 날짜, 실험자 이름을 적는다.
2)알콜램프를 이용해 루프를 멸균 후 공기중에서 식힌다.
3)균 배양액을 루프를 이용하여 취한다.
4)plate에 획선평판법으로 도말한다.
5)37도에서 16시간 이상 배양한다.
6)균이 배양된 LB plate를 파라필름으로 싸서 4도에서 보관한다

키워드

균배양,   실험,   균 배양,   미생물 관찰,   배지의 종류,   미생물,   배양