[기초 생물학] 단백질검출 실험 - 닌히드린 반응과 뷰렛 반응 실험을 통하여 단백질을 검정

소개글

[기초 생물학] 단백질검출 실험 - 닌히드린 반응과 뷰렛 반응 실험을 통하여 단백질을 검정에 대한 보고서 자료입니다.

목차

I. 실험 목적(Purpose of experiment)
II. 배경지식(Background knowledge)
1. 단백질의 구조
2. 단백질의 기능
3. 닌히드린 반응
4. 뷰렛 반응
5. 단백질의 소화
III. 가설 설정(Setting up hypothesis)
V. 결과(Results)
VI. 고찰
VII. 인용문헌(Literature cited)

본문내용

종류
1% albumin(단백질)
1% starch(탄수화물)
1% histidine(아미노산)
우유(당+지질+단백질)
결과
양성
음성
양성
양성
그림 4의 용액은 왼쪽부터 albumin, starch, histidine, 우유이며, 그림 5의 용액도 같은 순서이다.
닌히드린 용액을 첨가한 시험관을 중탕기 에서 중탕한 뒤 꺼내어보자 옅은 노란색을 띠던albumin용액의 색은 주황색으로 변해있었고, starch용액은 아무런 변화도 보이지 않았다. 또한 노란 빛이 돌긴 하지만 거의 투명하던 histidine용액은 짙은 보라색으로 변해있었으며 우유는 원래의 것과 차이가 희미하긴 하지만 아주 약간 보라색을 띠고 있었다. 이로써 탄수화물인 starch를 제외한 모든 시약에서 반응이 일어난 것을 알 수 있다.
VI. 고찰
뷰렛반응
왜 뷰렛반응에서는 알부민과 우유만 반응을 나타냈을까? 이는 뷰렛반응은 뷰렛 구조를 가진 물질과만 반응하기 때문이다. 탄수화물인 starch, 즉 녹말용액은 물론 반응할 이유가 없고, 히스티딘 용액은 아미노산이기 때문에 결합구조가 없는 단일 아미노산과는 반응하지 않는 뷰렛반응 시약의 특성 탓에 반응이 나타나지 않는다.
이 뷰렛반응의 원리는 간단하다. 뷰렛반응 시약 속에는 2가의 구리이온이 들어있는데, 그렇기 때문에 시약은 푸른빛을 띠게 된다. 그리고 이 시약이 단백질과 만나면 보라색으로 색이 변하는 성질을 이용해 단백질을 검출해 내는 것이다.
색이 변하는 이유는, 펩티드 결합이 두 개 이상 존재하는 구조를 일컫는 뷰렛구조가 2가의 구리 이온과 반응하여 보라색의 착화합물을 형성하는 것. 기본적으로 모든 단백질은 무수히 많은 펩티드결합을 가지고 있기 때문에 뷰렛반응으로 검출해낼 수 있는 것이다. 따라서 굳이 단백질뿐만 아니라 단 몇 개의 펩티드결합을 가지고 있는 펩티드도 검출할 수 있다.
2. 닌히드린 반응그림
내용
기본적으로 닌히드린 반응은 아미노산에 반응한다. 그 반응과정은 다음과 같다. 아미노기가 부착된 화합물(I)과 닌히드린(II)이 반응하면 케티민(III)이 생성되며, 이것이 탈탄산되어 알디민(IV)이 되고, 알데히드가 유리되어 중간체 아민(V)이 된다. 아민은 또다른 1분자의 닌히드린과 반응하여 적자색의 디케토히드린디리덴-디케토히드린다민(루만자색)(VI)를 생성한다.
또한 프롤린이나 히드록시프롤린 등의 아미노산은 황적색물질을 생성하며, 낮은 pH에서 반응성이 높고, 적색을 나타낸다.
그래서 실험결과 알부민은 주황색을, 히스티딘과 우유는 보라색을 나타낸 것이다.
또한 우유에서 색이 선명하게 나타나지 않은 것은, 우유에는 단백질뿐만 아니라 다른 많은 물질이 존재하기 때문에 반응이 약하게 나타난 것으로 예상된다.
용액 내 반응에는 히드린단틴법, 염화주석법, KCN법 등이 있으며, 아미노산 뿐만 아니라 핵산염기인 구아노신이나 시티딘 등과도 반응한다.
그림 7. 닌히드린 반응식
VII. 인용문헌(Literature cited)
1. <두산백과>
2. <강영희, 2008, 생명과학대사전, 아카데미서적, 총 2300p>

키워드

기초 생물학,   단백질검출 실험,   닌히드린 반응과 뷰렛 반응 실험을 통하여 단백질을 ,   단백직의 구조,   분자량