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실험에서는 EcoR Ⅰ, Nde Ⅰ, Xho Ⅰ의 3가지 제한효소를 사용한다.
⑦ Electrophoresis apparatus (전기영동장치)
⑧ Electrophoresis agarose
Fig 13. Electrophoresis apparatus
- 전기영동을 하는 기기로, DNA의 크기가 클수록 느리게 이동하게 되고, 전기장의 방향 또한
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미드 (Plasmid) 는 생장에 필수적인 염색체 (Chromosom) DNA에서 물리적으로 분리되어 있는 대표적인 에피솜 DNA 분자이다.
⑤ Nuclease free water
⑥ Forward primer, Reverse primer
Fig 12 . Nuclease free water
- 핵산 실험을 할 때, 문제되는 핵산을 포함하고 있지 않은
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실험에 있어서 cell의 검출 목적 등에 이용되며, 특정 파장의 UV를 조사하여 형광을 일으키므로 투명성과 UV intensity가 탁월하기 때문에 electrophoresis 실험 시 미량의 DNA도 검출할 수 있다.
FIg 16. TAE buffer
- Tris Acetate, EDTA Buffer이며 전기 영동시 DNA
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DNA를 만드는 단계이다. 이번 실험에서는 pfu polymerase를 통해 primer를 연장하여 새로운 DNA 가닥을 만든다. 원하는 PCR 산물의 크기가 크거나 반응효소의 농도가 낮을 때는 시간을 연장시킬 수도 있다.
(4) 전기영동 기기에 Agarose gel을 넣고 1X TAE buff
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실험을 성공적으로 진행했다고 할 수 있다.
※ 점착성말단과 비점착 말단
제한효소가 DNA를 절단한 뒤 잘린 부위는 점착성 말단 (sticky end)과 비점착성 말단(blunt end) 두 종류로 분류할 수 있다. 점착성 말단은 이중가닥의 DNA를 엇갈리게 절단하
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실험 시 유의사항
- 원심분리시킬 때 micro tube 끼리의 무게가 대칭이 되게 해야 한다.
- S1 Buffer는 중성 pH에 가깝기 때문에 사용하는 중에 오염될 위험이 있다. 따라서 저온에 보관해야 장기간 사용할 수 있기 때문에 냉장보관해야 한다.
- S2 Buf
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였다. 열전대는 간단한 장비로 넓은 범위의 온도를 측정할 수 있는 비교적 쉽고 간단한 측정기임을 알 수 있다.
실험 결과를 보면 측정값과 선형화한 값에 약간의 오차가 발생하였음을 알 수 있다. 이는 실험 중 항온조의 온도를 증가시키면
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① 검액 1ml에 진한 질산 0.5ml를 가하면 백색 침전이 생긱고, 가열하면 황색이 된다.
② 냉각후 진한 암모니아수 또는 40% NaOH 1ml를 가하여 색변화를 관찰한다.
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공학연구, 15(1)
·이건창, 정남호(2000), 가상현실 기법을 적용한 인터넷 쇼핑몰과 소비자 구매의도에 관한연구, 경영학 연구
·허운나(1997), 정보 시대 국가 경쟁력과 가상 대학의 역할. 국회 가상정보가치 연구회 심포지엄 주제 발표 Ⅰ. 서
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공학, 나아가 전기, 전자, 컴퓨터공학등 공학 전반의 내용들이 두루 포함되는 시스템을 직접 체험 볼 수 있는 유일한 과목이라고 생각한다. 앞으로도 더욱 계승 발전시키길 바란다.
(2) 발전시킬 사항
이번 실험에서 시간관계상 하지 못한 것은
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