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효소
1) Type I restriction enzyme
2) Type II restriction enzyme
3) Type III restriction enzyme
■ 제한효소를 이용한 DNA의 절단
■ 전기영동 ( electrophoresis )
■ DNA 정량
(1) DNA의 농도측정 원리
(2) 분광광도계( Spectrophotometer)
4. 실험재료
5. 실험방법
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DNA를 이용하였을 경우 재조합 DNA의 선별방법을 설명하라.
4R-2. Single Restriction Enzyme으로 절단된 vector의 경우 self-ligation 으로 인하여 외래 DNA가 삽입되는 효율이 매우 낮다. 이 경우 어떻게 하면 외래DNA를 쉽게 삽입시킬 수 있을 지 의견을 제
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효소인식부위(NdeⅠ,NheⅠ)를 이용하면 NdeⅠ, NheⅠ를 가진 외부 DNA를 클로닝할 수 있다. 이러한 방향성 클로닝은 외부 DNA를 벡터 안에 뒤집혀 들어갈 염려를 할 필요 없이 한쪽 방향으로 들어가도록 할 수 있다.
6. Reference
유전학의 이해 . Robert H
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제한효소를 다뤄보니 새롭고 재밌었다. 이번 실험은 전에 했던 실험과 다르게 과정도 복잡하지 않았지만 약간의 실수를 해서 좋은 결과를 얻지 못했다.. sample이 여러 줄로 나온 이유는 전기영동을 너무 오래 해서 DNA가 잘 이동하지 못하였다.
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DNA를 다시 붙이는 Ligation of DNA를 할 예정이다. 생물의 가장 기본 구조인 DNA를 잘랐다 붙였다 할 수 있는 것을 보면 새삼스레 신기하다는 것을 느낀다. 예비
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목차
1. 서 론
2. 실험 방법
2.1. LB Agarose 배지와 LB Broth 제조 및 멸균
2.2. LB-Ampicilin 첨가
2.3. E. coli JM109 (pGEM-T-Easy-DXS, pBlueScript-KS(+)) 접종
2.4. Plasmid 분리
2.5. 제한 효소 절단
2.6. Agarose Gel 제작
2.7. 전기영동 및 DNA 확인
3. 결과
3.1. E. c
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실험에서 사용될 제한효소란 세균이 박테리오파지의 공격을 받으면 생산하는 효소로 이중 나선의
DNA의 특정한 염기서열을 인식해 그 부분의 절단에 있어 촉매작용을 하는 효소를 말한다. 대부
분의 제한효소는 인식자리(recognition site) 또는
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제한효소는 단일 혹은 이중나선의 DNA에 존재하는 특정 뉴클레오티드 서열을 인지하여 자르는 효소이다. 제한효소는 조성과 필요로 하는 효소 보조인자, 작용하는 서열에 따라 크게 4개의 그룹으로 나눌 수 있다. type1의 경우 제한효소절단부
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DNA가 세포 내로 주입되었는지 아닌지를 판별할 수 있는 것이다. 세 번째로 Multiple cloning site(MCS)를 가지고 있다. vector는 일정부위에 제한효소 절단부위가 밀집된 부분이 있어서 cloning에 용이하다.마지막으로 Vector 부위를 이용한 DNA sequencing, 단
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DNA, 디옥시리보 핵산)의 이중나선
1. 염기쌍 형성과 DNA의 이중나선
2. 두 DNA 가닥의 역평행배열
3. 생물의 종류에 따른 DNA의 염기조성
4. DNA 나선의 형태
Ⅳ. 핵산(DNA, 디옥시리보 핵산)의 재조합기술
1. 제한효소
2. DNA 연결효소
3. DNA 클로
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