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효소
- DNase: DNA에만 작용하는 핵산가수분해효소
- 핵산가수분해효소(nuclease): 특이성 없이 DNA나 RNA에 다 작용하는 효소
- 제한효소: 4~8 뉴클레오티드 길이의 특정 뉴클레오티드 서열에만 작용하는 핵산가수분 해효소()
1형 제한효소, 3형 제한효
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뽑아 RNase가 첨가된 TE buffer로 DNA를 녹인것.
3. 제한효소 BamHI으로 plasmid를 자른것. (control)
1번은 2~2.5kbp에서부터 아래로 길게 주욱 늘어져 있는 모양이고, 2번은 2kbp와 2.5kbp사이에(2kbp에 더 가깝다), 3번은 3kbp에 아주 희미하게(사진상으론 보이지
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Abstract
이번 실험은 유전자 재조합에 가장 빈번하게 사용되는 E.coli의 plasmid DNA를 추출하는 기술로서 alkaline lysis 를 이용하여 plasmid DNA를 추출하고, 이를 제한효소로 분석하여 검증하는 것이었다. Alkaline lysis를 이용한 Mini-scale preparation of plasmid
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Ⅰ. 들어가며 Ⅱ. DNA의 물리화학적 구조 1. DNA란 무엇인가? 2. DNA의 종류 3. DNA의 구조 Ⅲ. 미생물에 의한 유전물질의 교환방법 1. 유전자 재조합 (Recombination DNA) 1) 제한효소 (制限酵素, restriction enzyme) 2) 플라스미드 (plasmid) 3) 리가아제 (ligase) 가.
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DNA구조가 밝혀진 후, DNA의 물리화학적 성질이 밝혀지고, 각종 DNA 분해 또는 합성효소, 특히 세균에서 DNA의 일정한 부위를 절단하는 제한효소 등의 발견은 유전자 조작을 한층 손쉽게 하였다.
과학의 연구와 그 발전은 기술의 발전을 이루었고
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효소. 정제된 DNA ligase는 유전자 클로닝 작업에서 DNA분자들을 서로 연결시키는데 사용된다.
①-2 ligation 실험에서 중요한 요소 : 반응액에서 DNA분자의 end 농도이며 이는 ligase의 기질로 작용하기 때문이다.
② 제한효소로 절단된 부위 붙이는 방
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제한효소가 인지하는 부위에 영향을 주면 특정한 제한효소로 절단하였을 때 생기는 DNA 단편의 크기가 차이가 남. southern blotting 방법에 의존함 →제한효소로 DNA 자른 후 전기영동하여 크기에 따라 분리. DNA를 알칼리로 변성하여 나일론막으로
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http://bric.postech.ac.kr/
날 짜
학 번
성 명
담당 교수님
(http://bric.postech.ac.kr/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=87142)
http://www.vivo.colostate.edu/hbooks/genetics/biotech/enzymes/ligation.html 1. Abstract
2. Introduction
3. Material & Method
4. Result
5. Discussion
6. Reference
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DNA 의 점착성 말단이 상보적 결합 형성하여 Recombinant Plasmid 형성 1. INTRODUCTION TO BIOTECHNOLOGY
1) RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY
2. TOOLS OF BIOTECHNOLOGY
1) SELECTION & MUTATION
2) RESTRICTION ENZYMES (제한효소)
3) VECTORS
4) POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)
3. TEC
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DNA 는 이름 그대로 산(acid)이기 때문에 수용액에 있으면 조금씩 pH가 낮아져 DNA가 손상된다고 하므로, 위와 같이 tris buffer를 넣어줍니다. 또한 DNA를 변형시키는 효소들은 magnesium과 같은 2가 이온을 필요로 하므로 EDTA 를 조금 넣어주면 이런 효
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